詳細介紹
雜交瘤細胞株,;FABP 4A8圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞株,;FABP 4A8圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內,,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
PCMT1 天門冬氨酸甲基轉移酶PCMT抗體規(guī)格: 0.2ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Neurexin 1 軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體規(guī)格: 0.2ml
SCHIP1/IQCJ IQCJ抗體規(guī)格: 0.1ml
MTLR 胃動素受體抗體規(guī)格: 0.1ml
C22orf25 22號染色體開放閱讀框25抗體規(guī)格: 0.2ml
SynCAM 細胞粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml
MLC3F/MYL1/3 肌球蛋白輕鏈1/3抗體規(guī)格: 0.2ml
HEBP1/p22HBP 血紅素結合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
CD45/B220 白細胞共同抗原抗體規(guī)格: 0.1ml
MASP 甘露聚糖結合凝集素絲氨酸肽酶1抗體規(guī)格: 0.2ml
C1orf180/AIDA 1號染色體開放閱讀框80抗體規(guī)格: 0.2ml
MMP9 基質金屬蛋白酶9抗體 0.1ml
LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
JWA JWA蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
ACADM/MCAD ?;o酶A脫氫酶中鏈抗體 0.2ml
LASS6 壽相關基因lASS6抗體規(guī)格: 0.2ml
C17orf49 17號染色體開放閱讀框49抗體規(guī)格: 0.2ml
A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體 0.1ml200mL 大鼠中性粒細胞分離液 1.091
鈣調神經(jīng)磷酸酶測試盒 24 T 18-0250-24
無內毒素槍頭,1 mL 1盒 130503-96
100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷
50 次 DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)
50 次 柱式細菌 RNAout
1mL XL-10 gold 菌種
Klenow 片段 200U 131015-200
miRNA PAGE 膠回收試劑盒 40 次 70604-40
1mL 羧芐青溶液 ,50mg/mL
24 次 單細胞全轉錄組擴增試劑盒
30 次 一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)
30μL 組蛋白 3.1 小鼠單抗
Lambda 核酸外切酶 1000U 130628-1000
甜菜堿溶液,,5M,,PCR 1.5mL 70902-1.5
150 次 天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒
1mL EHA103 農(nóng)桿菌菌種
100mL 一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )
20 次 DNA 磷酸化試劑盒
N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 5g CAS7512-17-6
魚類種屬鑒定 PCR Mix 100 次 131128J-100
1mL XL-10 gold 菌種
500UN 甘油醛 -3- 磷酸脫氫酶