詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株;1-19-1價格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
雜交瘤細(xì)胞株,;1-19-1價格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1抗體規(guī)格: 0.2ml
MRG15 轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體規(guī)格: 0.2ml
WSB2/WD SOCS box protein 2 信號傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格: 0.2ml
BAP135/TFII I 蛋白酪氨酸激酶BAP135抗體規(guī)格: 0.2ml
NMT1 豆蔻?;D(zhuǎn)移酶1抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體規(guī)格: 0.1ml
GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
ORP8 氧化固醇結(jié)合蛋白8抗體規(guī)格: 0.2ml
NR2D/NMDAR2D 谷氨酸受體2D抗體規(guī)格: 0.1ml
Plakophilin 2 橋粒斑菲素蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
IGFR3/CD16 FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體規(guī)格: 0.1ml
MMP-20 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體規(guī)格: 0.1ml
C3orf33 3號染色體開放閱讀框33抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
LIF 白血病抑制因子抗體規(guī)格: 0.1ml50L 超快核酸電泳液干粉
1個 4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)
活/死細(xì)胞染色試劑盒(Calcein AM·PI) 1000 次 140632-1000
環(huán)氧基磁珠 2mL 130517-2
1mL SMD1163 酵母菌種
1mL DH5α 菌種
40 次 miRNA PAGE 膠回收試劑盒
1mL WB600 枯草宿主菌菌種
人培養(yǎng)細(xì)胞基因組 DNA 30μg 131035-30
超螺旋 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn) 100uL 130960-100
50 次 雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 488·PI)
10μL HRP 標(biāo)記的抗生物素抗體
5g 葉酸
10mL 弗氏不*佐劑
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 5mg CAS114162-64-0
色素細(xì)胞生長因子 - 不含 TPA 5mL 21-0090-5
一管式拭子 DNAout 20 次 60501-20
1000U RecJf 核酸外切酶