雜交瘤細胞株；9H3圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。

細胞名稱 雜交瘤細胞株；9H3圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開,。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

CK16  細胞角蛋白16抗體規(guī)格: 0.1ml
Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37  肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-SMC1(Ser957)  磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體規(guī)格: 0.1ml
Cecropin  抗菌肽/天蠶素抗體規(guī)格: 0.2ml
DOCK1  細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
SFRP1  分泌型卷曲相關蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
STK36  絲氨酸/蘇氨酸激酶36融合同源蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
XAGE2  瘤/睪抗原12家族2抗體規(guī)格: 0.2ml
Rho C  RhoC抗體規(guī)格: 0.1ml
CHMP1A  染色質(zhì)修飾蛋白1A抗體規(guī)格: 0.2ml
Septin 8  細胞分化蛋白SEPT8抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體規(guī)格: 0.1ml
CCR9  細胞表面趨化因子受體9抗體規(guī)格: 0.1ml
JAKMIP2/NECC1  JAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）規(guī)格: 0.2ml
PPIG  親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體規(guī)格: 0.2ml
Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體規(guī)格: 0.1mlABI 高通量 DNA 測序    1次    D009-1
T7 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒    50 次    91106A-50
10g        維生素 B1
20 次        克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液
10mL        弗氏*佐劑
5mL        肝細胞生長因子
100g        DNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD）    20 次    140631-20
Southern Marker Oligo( 生物素 )    20 次    120654E-20
10mL        石蠟油,，PCR 
25 次        動物細胞核蛋白微量制備試劑盒
1g        羥基脲
25mg        嗜熱菌蛋白酶
硫酸鎂七水    100g    CAS10034-99-8
胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL    1mL    100835-1
50 次        柱式凝固血液 DNAout
100g        馬來酸
1mL        ATP 溶液,，1mM
10mL        DNA 上樣液 ( 紅 ),6×
1mL        JM83 菌種