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小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006圖片

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品       牌ATCC

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-01-23 13:51:29瀏覽次數(shù):415次

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小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞;MNSK/HL-006圖片售后:收到細(xì)胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決,。

小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞,;MNSK/HL-006圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。

細(xì)胞名稱 小鼠正常皮膚角質(zhì)細(xì)胞,;MNSK/HL-006圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

Netrin 4  軸突生誘向因子4抗體規(guī)格: 0.1ml
PI3 Kinase p110 delta  磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體規(guī)格: 0.1ml
RPH3AL  Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
PAPPA  娠相關(guān)血漿蛋白A抗體規(guī)格: 0.1ml
phosphos-PCNA (Tyr211)  磷酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體規(guī)格: 0.1ml
Bax  Bax抗體規(guī)格: 0.1ml
CRISP3  富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-RPS6KB1(Thr 412)   磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-ATG1(Ser556)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
Ferritin Light Chain  鐵蛋白輕鏈抗體規(guī)格: 0.1ml
ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體規(guī)格: 1ml
MRF/C11orf9  髓鞘基因調(diào)控因子抗體規(guī)格: 0.2ml
SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2  肝細(xì)胞生因子激活抑制蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
NCF/NCF4/p40phox  嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體規(guī)格: 0.1ml
CRIPT  突觸后蛋白CRIPT抗體規(guī)格: 0.2ml
RBM5/LUCA15  瘤抑制基因LUCA15抗體規(guī)格: 0.2ml
MLH1/hMLH 1  錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml
MMAA/cblA  甲基丙二酸尿癥cblA抗體規(guī)格: 0.2ml高鹽察氏瓊脂/高鹽察氏培養(yǎng)基/Salt Czapek Dox Agar用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞英文名稱:COS-1
木糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肝細(xì)胞英文名稱:BRL
五號(hào)膽鹽/5號(hào)膽鹽/膽鹽5號(hào)/膽酸-脫氧膽酸鈉鹽混合物/Bile salt No. 5BR,70%25克國產(chǎn)/進(jìn)口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml,、18ml國產(chǎn)
RAG(小鼠腎腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)gersion
PATU8988(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞gersion
MSTO-211H(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
DH82(犬巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞英文名稱:A9
ACHN, 人腎細(xì)胞腺細(xì)胞
豚鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱:GPL1
3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NZYM肉湯/NZYM BrothBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱:A172

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