詳細介紹
產(chǎn)品名稱:T 人睪酮elisa實驗步驟
英文名稱:T Elisa Kit
產(chǎn)品貨號:GOY-0718E
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃,。
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
檢測目的:用于檢測血漿,,血清及相關液體等樣本,。例如灌洗液,、腦脊液、血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、等動植物。
具有如下優(yōu)點:公司產(chǎn)品僅用于科研
一,、高效,、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性,;
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費,。
性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml,。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應,。
4) 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5) 貯藏:2-8℃,,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,,即可終止酶反應,。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵,。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
操作步驟:
夾心法,,一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
加入待測檢體,,檢體中若含有待測的抗原,,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結(jié);
洗去多余待測檢體,,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結(jié);
洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,,加入帶有酶的二次抗體,,與一次抗體鍵結(jié);
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果;
間接法,,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原,。
加入待測檢體,,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結(jié),。
洗去多余待測檢體,,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結(jié),。
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值,,以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量,。
競爭法,其操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,,完成后洗去多余抗體
加入待測檢體,,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結(jié)
加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結(jié),,由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,,亦即,,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),即所謂競爭法之由來,。
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注:本公司提供試劑盒免費代測服務,。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。