詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株,;4G1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株,;4G1圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi),。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
核酸內(nèi)切酶 V 250U
二硫蘇糖醇 (DTT) 5g
十二烷基磺酸清除劑 25mL
CAS108321-42-2 遺傳 100mg
100602-250 干粉型 LB 培養(yǎng)基 250g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH) 30 次
間充質(zhì)干細(xì)胞脂防細(xì)胞分化生長(zhǎng)因子 5mL
β- 乙醇 100mL
魯米諾 1g
CAS7220-79-3 次(亞)甲基蘭 10g
120705-5 L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 5g
支鏈淀粉 1g
苦杏仁苷 1g
磷酸二氫 250g
EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
131052-10 β- 乙醇,蛋白 10mL
柱式土壤 RNAout 50 次
磷酸二酯酶Ⅱ 10U
CN/DAB 底物套裝 1套 Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:3T3A31
A875/黑色素瘤細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
胎兒真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
ONPG發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人甲狀腺濾泡上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
改良Frey氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Frey Medium Modified Base250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
黑色素瘤英文名稱:B16瘤
真菌培養(yǎng)基/霉菌培養(yǎng)基/Mould Medium用于無(wú)菌試驗(yàn)及真菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
CaES-17(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
高分化鼻咽細(xì)胞英文名稱:CNE-1
SK-MES-1(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)/卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎(chǔ)/Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
肺鱗英文名稱:NCI-H520
明膠蛋白胨/蛋白胨E/Gelatin PeptoneBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口