需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,,容量瓶等
![](https://img65.chem17.com/ebd03a134538f5065c40e0cafffe34dd87500382b437ba2fac52442d7933c3f08ade65afa94fc22f.png)
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好
控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn),。
魚乙酰羧化酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; ACCase
魚過氧化物酶體增殖物激活受體βELISA試劑盒 英文縮寫,; PPAR-β
魚固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1CELISA試劑盒 英文縮寫; SREBP-1C
帕霉素靶蛋白C1ELISA試劑盒 英文縮寫,; mTORC1
魚AMP激活蛋白激酶αELISA試劑盒 英文縮寫,; AMPKa
人錳超氧化物歧化酶ELISA試劑盒 英文縮寫; Mn-SOD;SOD2
A1ELISA試劑盒 英文縮寫,; IgA1
AELISA試劑盒 英文縮寫,; IgA
DELISA試劑盒 英文縮寫; IgD
E Fc段受體ⅠELISA試劑盒 英文縮寫,; FcεRⅠ
魚細(xì)胞色素P450芳香化酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; P450 arom
魚細(xì)胞色素P450家族成員2C19ELISA試劑盒 英文縮寫; CYP2C19
魚細(xì)胞色素P450羥化酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; CYP17A1
魚細(xì)胞色素P450羥化酶ELISA試劑盒 英文縮寫,; CYPH
魚細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶ELISA試劑盒 英文縮寫; ERK1;2
17-OHP 人17羥孕酮ELISA定量試劑盒豬分泌型AELISA試劑盒 英文縮寫,; sIgA
豬甘油三酯ELISA試劑盒 英文縮寫,; TG
豬高密度脂蛋白ELISA試劑盒 英文縮寫; HDL
豬睪酮ELISA試劑盒 英文縮寫,; T
豬鉤端螺旋體IgG抗體ELISA試劑盒 英文縮寫,; Lep IgG
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測(cè),。公司產(chǎn)品僅用于科研