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小鼠胚胎細(xì)胞,;RMD9圖片

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品       牌ATCC

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-01-23 13:57:27瀏覽次數(shù):378次

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小鼠胚胎細(xì)胞,;RMD9圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱 小鼠胚胎細(xì)胞,;RMD9圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。

ENS medium
Cytophaga hutchinsonii medium
Desulfurella medium (brackish water)
Fusibacter tunisiensis medium
Haloplasma contractile medium
Lowenstein-jensen medium
Methanobrevibacter cuticularis medium
Middlebrook medium with mycobactin
Nicotinic acid medium
Prolixibacter medium gysw
Ruminobacter amylophilus medium
Starkeya novella medium
Thermodesulfobacterium medium
Tryptic soy broth (anaerobe),1/2
干粉型SOC培養(yǎng)基
大腸桿菌TG1菌種
AGS細(xì)胞株
COS-1 [COS1]細(xì)胞株
HFTF細(xì)胞株RAB40B  RAS基因家族蛋白R(shí)AB40B抗體規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
Phospho-BMX/ETK (Tyr556)  磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體規(guī)格: 0.1ml
Signal recognition particle  信號(hào)識(shí)別顆??贵w規(guī)格: 0.1ml
Mouse anti-rat IgG ascites  小鼠抗大鼠IgG腹水規(guī)格: 1ml
DMT1  金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體規(guī)格: 0.1ml
PSF2  PSF2蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
TOPO II/TOPO II Alpha  DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體規(guī)格: 0.1ml
Claudin 14  緊密連接蛋白14抗體規(guī)格: 0.2ml
RPS3  核糖體蛋白S3抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-MYPT1/MBS(Ser507)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-cdc2 (Tyr15)  磷酸化周期素依賴激酶2抗體規(guī)格: 0.1ml
PPAPDC3  磷脂酸磷酸酶2結(jié)構(gòu)域3抗體規(guī)格: 0.2ml
Securin/PTTG  垂體瘤轉(zhuǎn)化基因抗體規(guī)格: 0.1ml
ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰膽堿酶抗體 0.1ml
LH  人促黃體生成素抗體規(guī)格: 0.1ml
Apg10  自噬相關(guān)蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml
ABCG8  三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體 0.2ml

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