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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-17 09:06:12瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8a3說(shuō)明書(shū)
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;HB NI8價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;HB NI8價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
100mL β- 乙醇
1g 魯米諾
次(亞)甲基蘭 CAS7220-79-3 10g
L- 谷胱甘肽 ( 還原型 ) 120705-5 5g
1g 支鏈淀粉
1g 苦杏仁苷
250g 磷酸二氫
10×100μL EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
D- 核糖 CAS50-69-1 5g
β- 乙醇,,蛋白 131052-10 10mL
50 次 柱式土壤 RNAout
10U 磷酸二酯酶Ⅱ
1套 CN/DAB 底物套裝
100 次 糞便 DNAout
2mL 環(huán)氧基磁珠
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)服務(wù) D025-1 一個(gè)基因
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 121004-10 0.1mL×10
100μL 小鼠抗 S1 標(biāo)簽單抗
5g 甲苯胺藍(lán)
5g β- 環(huán)狀糊精
96 支 10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 ) GIMAP7 GTP酶IMAP家族成員7抗體 規(guī)格:0.2ml
LRRC41 LRRC41蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-ATF2 (Thr53) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格:0.1ml
Coronin 1a 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體 規(guī)格:0.2ml
phospho-PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體 規(guī)格:0.1ml
FBXO4 FBXO4蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
Repetin 中間絲相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
PACRG 麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
MID1/Midline-1/RNF59 環(huán)指蛋白59抗體 規(guī)格:0.2ml
Myocardin 促管平滑肌細(xì)胞分化因子抗體 規(guī)格:0.2ml
LMBR1/DIF14 分化相關(guān)基因14抗體 規(guī)格:0.2ml
APNG/MPG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 規(guī)格:0.2ml
ANGEL1 ANGEL1蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
C3orf23 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體 規(guī)格:0.2ml
Orosomucoid 2 類粘蛋白2抗體 規(guī)格:0.2ml
Chondroitin Sulfate 硫酸軟骨素抗體 規(guī)格:0.2ml
OLFM3/Optimedin 嗅球蛋白3抗體 規(guī)格:0.2ml
PCDHB5 原鈣粘蛋白β5抗體 規(guī)格:0.2ml
Phospho-p53BP1 (Ser1778) 磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格:0.1ml
ATP citrate lyase/ACLY 三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 規(guī)格:0.2ml
Salmonella tropina 沙門氏菌菌體蛋白抗體 規(guī)格:0.2ml
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