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小鼠雜交瘤細胞,;HB S6F1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內,活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
小鼠雜交瘤細胞;HB S6F1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
Smoothened/SMO 跨膜蛋白Smoothened抗體 規(guī)格:0.1ml
SLY 2型豬鏈球菌溶素抗體 規(guī)格:1ml
phospho-TERT(Ser1125) 磷酸化端粒酶逆轉錄酶抗體 規(guī)格:0.1ml
phospho-TPH(Ser260) 磷酸化色氨酸羥化酶抗體 規(guī)格:0.1ml
Phospho-Tyk2(Tyr1054/1055) 磷酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體 規(guī)格:0.1ml
WEE1 protein WEE1蛋白抗體 規(guī)格:0.1ml
Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗牛IgG腹水 規(guī)格:1ml
Dog IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格:0.1ml
Goat Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格:0.1ml
Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗人IgG 規(guī)格:0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Bio 生物素標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格:0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格:0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgG 規(guī)格:0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗羊IgM 規(guī)格:0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/APC APC標記的兔抗人IgM 規(guī)格:0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgM 規(guī)格:0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE PE標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格:0.1mlDiBAC4(3) 22-0210-25 25mg
1μL 超微量分光光度計 120664-1 1個
10g 葡聚糖 T-40
15ku 半纖維素酶
0.1mg Staurosporine(PKC 抑制劑 )
500U 堿性磷酸酶,牛小腸
Tocopherol( 抗氧化劑 ) 23-0780-2 2g
大提柱式細菌 DNAout( 含溶菌酶 ) 80927B-4 4次
10mL RNase-free 水
25 T 超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+Mg2+ATPase)
50mL 通用洗柱液
250 次 柱式凍存血液 DNAout
超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+ATPase) 18-0150-25 25 T
DNA Guanidine HCl( 鹽酸胍 ) 101212-100 100g
100U Sulfolobus DNA 聚合酶 IV
50 次 DNA 電泳分子量標準 (250-1500 bp)
50 次 柱式動物 RNAout
1mL SG1117 菌種
Red-Tth DNA 聚合酶 130836-250 250U
柱式 DNA 膠回收試劑盒 60202-100 100 次
10g 酸洗玻璃珠系列
4次 大提柱式植物 DNAout
1mL SDS-PAGE 上樣液,,5×
30μL α-Actin 小鼠單抗
核酸內切酶 IV 130638-1000 1000U
PCR 優(yōu)化試劑盒 100844-1 1套
1個 陶瓷研缽 ( 直徑 60 mm)
Donkey Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗人IgG 規(guī)格:0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格:0.1ml
Streptavidin/SA protein 鏈酶親和素抗體 0.1ml
phospho-c-Abl(Tyr272) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
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