詳細(xì)介紹
抗鼠CD4單克隆細(xì)胞;YTS 191.1.2 價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
抗鼠CD4單克隆細(xì)胞,;YTS 191.1.2 價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
抗鼠CD4單克隆細(xì)胞,;YTS 191.1.2 價(jià)格【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 抗鼠CD4單克隆細(xì)胞,;YTS 191.1.2 價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞分佖CD4不同抗原決定簇單抗,,用于CD4單抗的制備。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C9
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
抗鼠CD4單克隆細(xì)胞,;YTS 191.1.2 價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Indomethacin heptyl ester (1 mg)1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetic acid,, 1-heptyl ester,; Indomethacin heptyl ester
Ozagrel (10 mg)3-[4-(1H-imidazol-1-ylmethyl)phenyl]-2E-propenoic acid; OKY-046,; Ozagrel
Valeroyl Salicylate (100 mg)2-[(1-oxopentyl)oxy]-benzoic acid,; 2-Valeryloxybenzoic Acid; Valeroyl Salicylate
Lactacystin (1 mg)3S-hydroxy-2R-(1-hydroxy-2-methylpropyl)-4R-methyl-5-oxo-2-pyrrolidinecarboxylate-N-acetyl-L-cysteine,; Lactacystin
PPOH (10 mg)2-(2-propynyloxy)-benzenehexanoic acid,; PPOH
L-hydroxy Arginine Acetate (50 mg)N5-[(hydroxyamino)iminomethyl]-L-ornithine, acetate; L-NG-hydroxy Arginine Acetate,; L-hydroxy Arginine Acetate
1400W (hydrochloride) (10 mg)N-[[3-(aminomethyl)phenyl]methyl]-ethanimidamide,, dihydrochloride; 1400W (hydrochloride)
FK-409 (10 mg)4-ethyl-2E-(hydroxyimino)-5-nitro-3E-hexenamide,; NOR-3,; FK-409
BHT (1 g)2,6-di-tert-butyl-4-hydroxytoluene,; Butylated Hydroxy Toluene,; BHT
S-Adenosylhomocysteine-d4 (5 mg)S-(5’-deoxyadenosin-5’-yl)-L-homocysteine-d4; SAH-d4,; S-Adenosylhomocysteine-d4菌體內(nèi)毒素清除劑 90901-200 200mL
5mL 前脂肪細(xì)胞生長因子
150mL 丙烯葡聚糖凝膠 S-300 HR
250 次 血液 RNAout
25μg Xa 因子蛋白酶
人單核細(xì)胞分離液 1.075 120903-200 200mL
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 ) 80921-5 5次
200U RsaI
10 管 穿刺培養(yǎng)基
50 次 一管式植物 DNAout
200mL 人中性粒細(xì)胞分離液 1.085
紅細(xì)胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測試盒 18-0350-48 48 T
TBE 電泳液 ,10× 90313-250 250mL
100μL 山羊抗人 IgG(H+L),,堿性磷酸酶標(biāo)記
抗鼠CD4單克隆細(xì)胞;YTS 191.1.2 價(jià)格10g DNA DTT( 二硫代蘇糖醇 )
1mL RNase-free 水
1mL MDS 42recA 菌種
Bsu DNA 聚合酶,,大片段 130616-200 200U
電泳 MOPS 100933-100 100g
50 次 T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒
50 次 蛋白膠微量回收試劑盒