詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞,;Human IgM圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞,;Human IgM圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1957年,Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,,CHO-K1是CHO的一個亞克隆,。CHO-K1的生長需要脯氨酸。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現用現配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內,活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
*熱穩(wěn)定單鏈結合蛋白50μg
R002-1RNA 分析技術服務1次
130698-253´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結構類似物25 OD
胃蛋白酶抑制劑5mg
GAPDH 小鼠單抗30μL
偏釩酸25g
Red-Taq DNA 聚合酶100U
140277-100酸水解酪素100g
130511-10JM110 感受態(tài)細胞10×100μL
小鼠抗 VSV-G 標簽單抗100μL
HRP 穩(wěn)定劑 / 稀釋劑200mL
對硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷1g
人重組 AP1(c-Jun)50fpu(-)-Blebbistatin (1 mg)1,,2,3,,3a-tetrahydro-3aS-hydroxy-6-methyl-1-phenyl-4H-Pyrrolo[2,,3-b]quinolin-4-one; (S)-Blebbistatin,; (-)-Blebbistatin
N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone (25 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-hexadec*,; N-palmitoyl-L-Homoserine|C16-HSL; N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone
GW 4869 (hydrochloride hydrate) (1 mg)3,,3’-(1,,4-phenylene)bis[N-[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]-dihydrochloride-2-propenamide,; GW 4869 (hydrochloride hydrate)
M 344 (10 mg)4-(dimethylamino)-N-[7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl]-benzamide,; Histone Deacetylase Inhibitor III|MS 344|D237; M 344
3-hexanoyl-NBD Cholesterol (500 ug)6-[(7-nitro-2,,1,,3-benzoxadial-4-yl)amino]-cholest-5-en-3-ol; 3-C6-NBD Cholesterol,; 3-hexanoyl-NBD Cholesterol
ZLJ-6 (10 mg)2-ami,,5-dihydro-1-methyl-5-[[methylsulfonyl)phenyl]methylene]-4H-imidazol-4-one- (methanesulfonate),; ZLJ-6
Biotin-NHS (100 mg)6aR-hexahydro-2-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-1H-thieno[3aS,,4-d]imidazole-4S-pentanoic acid,; Biotin N-hydroxysuccinimide ester|NSC 345668; Biotin-NHS
Myristic Acid (25 g)tetradecanoic acid,; NSC 5028,; Myristic Acid
PGDM (100 ug)9α,11β-dihydroxy-15-oxo-13,,14-dihydro-2,,3,18,,19-tetranor-prostan-1,,20-dioic acid; Prostaglandin D Metabolite,; PGDM
13,,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α (5 mg)9α,,11α,,15S-trihydroxy-16,16-difluoro-prosta-5Z-en-1-oic acid,; 13,,14-dihydro-16,16-difluoro PGF2α,; 13,,14-dihydro-16,16-difluoro Prostaglandin F2α
Aspalatone (50 mg)2-(acetyloxy)-2-methyl-4-oxo-4H-pyran-3-yl-benzoic acid ester,; Acetylsalicylic Acid Matol ester,; Aspalatone
CAS59-30-3葉酸5g
140409-20克必隆平末端克隆試劑盒(組成型)20 次
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝30 次