小鼠雜交瘤細胞；EphA1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞；EphA1圖片
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性  該雜交瘤細胞由湖南遠泰生物技術有限公司制備并提交,，細胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,，可用于基礎研究和臨床檢驗。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

3-（O-acetyloxime）,， 5-chloro-1-[（2，5-dichlorophenyl）methyl]-1H-Indole-2,，3-dione,， C30， LDN 57444LDN-57444
t-Butyl-2-（（6S）-4-（4-chlorophenyl）-2,，3,，9-trimethyl-6H-thieno[3，2-f][1，2,，4]triazolo[4,，3-a][1，4]diazepin-6-yl）acetateBromodomain Inhibitor,， （+）-JQ1
2,，KT5823
N-（2-Methoxy-2-oxoacetyl）glycine methyl esterDMOG
L-Threoascorbic acid， Antiscorbutic factor,， Vitamin CL-Ascorbic acid
4-（N-Maleimidomethyl）cyclohexane-1-carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium saltSulfo-SMCC
Treponemycin,； U 78548； C2989Borrelidin
（2R,，4S）-ethyl 2-ethyl-4-（methoxycarbonyl）-6-（trifluoromethyl）-3,，4-dihydroquinoline-1（2H）-carboxylate； CP-529414,， CP529414,， CP 529414Torcetrapib
N-（7-cyano-6-（4-fluoro-3-（2-（3-（trifluoromethyl）phenyl）acetamido）phenoxy）benzo[d]thiazol-2-yl）cyclopropanecarboxamideTAK-632
（1aR，Ingenol
Sodium Pneumocandin A0,， 1-（（4R,，5R）-4，5-dihydroxy-N2-（4-（5-（4-（pentyloxy）phenyl）-3-isoxazolyl）benzoyl]-L-ornithine）-4-（（4S）-4-hydroxy-4-（4-hydroxy-3-（sulfooxy）phenyl）-L-threonine）-Micafungin sodium
Methyl （4,，6-diamino-2-（1-（2-fluorobenzyl）-1H-pyrazolo[3,，4-b]pyridin-3-yl）pyrimidin-5-yl）（methyl）carbamate； RiociguatBAY 63-2521
N-Benzyl-2-（2,，3-dihydro-1,，4-benzoxazin-4-yl）-5，6,，7,，8-tetrahydroquinazolin-4-amine；CID49830260Ml241
Protease Inhibitor Cocktail II,， EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
T20 （TBS） Blocking BufferEZBlock T20 （TBS） Blocking Buffer
Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （12 biotin/BSA）Biotinylated Bovine Serum Albumin （Biotin-LC-BSA） （12 biotin/BSA）
（±）-2,，2’-bis（8-Formyl-1，6,，7-trihydroxy-5-isopropyl-3-methylnaphthalene,； NSC 56817； NSC 524336,； BL 193,； Pogosin（±）-Gossypol
星孢菌素Staurosporine131088-5熒光素 (FITC) 標記親和素5mg
90708-1.5即用型高保真 PCR 試劑盒1.5mL
脫氧膽酸5g
放線菌素 D 溶液 ,1mg/mL1mL
四甲基乙二胺25mL
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 )2000U
CAS90-44-8蒽酮25g
120513-20即用型藍白 T 載體 C 型 (T7-T3，無 MCS)20 次
苷5g
鈷柱介質(zhì)10mL
庚烷磺酸1g
接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
CAS9004-54-0葡聚糖 T-50010g
12-107Rosetta-gami(DE3) 菌種1mL
液相內(nèi)毒素清除劑100 次
JM109 菌種1mL
芥子酸1g
pNPP 干粉1g
CAS50-23-7氫化可5g
131232-10壯觀溶液 ,50mg/mL10mL
吲哚 -3- 丁酸1g
聚乙二醇 4000250g
水解乳蛋白100g
小牛胸 DNA 溶液1mL
CAS25322-68-3聚乙二醇 8000250g