小鼠單核巨噬細胞,；J774A.1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 小鼠單核巨噬細胞,；J774A.1圖片
形態(tài)特性  單核細胞/巨噬細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞來源于BABL/cN小鼠，有抗體依賴的吞噬作用,，生長受硫酸葡聚糖,、PPD和LPS的抑制,；可產(chǎn)生IL-1β和大量的溶菌酶。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

PB-22 5-hydroxyquinoline isomer （10 mg）quinolin-5-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate,； PB-22 5-hydroxyquinoline isomer
PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer （5 mg）isoquinolin-6-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate,； PB-22 6-hydroxyisoquinoline isomer
7-dehydro Cholesterol （50 g）cholesta-5，7-dien-3β-ol,； 7-DHC|NSC 18159|Provitamin D3|Δ7-Cholesterol,； 7-dehydro Cholesterol
Zaltoprofen （500 mg）10，11-dihydro-a-methyl-10-oxo-dibenzo[b,，f]thiepin-2-acetic acid,； CN 100|Soleton； Zaltoprofen
25E-NBOMe （hydrochloride） （5 mg）2-（4-ethyl-2,，5-dimethoxyphenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethan-1-amine,， monohydrochloride； 2C-E-NBOMe,； 25E-NBOMe （hydrochloride）
SU 9516 （1 mg）1,，3-dihydro-3Z-（1H-imidazol-5-ylmethylene）-5-methoxy-2H-indol-2-one； SU 9516
Leflunomide （50 mg）5-methyl-N-[4-（trifluoromethyl）phenyl]-4-isoxazolecarboxamide,； Arava|Avara|HW 486|SU 101； Leflunomide
Nitracaine （10 mg）3-（diethylamino）-2,，2-dimethylpropyl 4-nitrobenzoate,； Nitracaine
CTAP （1 mg）D-phenylalanyl-L-cysteinyl-L-tyrosyl-D-tryptophyl-L-arginyl-L-threonyl-3-mercapto-L-valyl-cyclic （2→7）-disulfide-L-threoninamide； CTAP
PF-04981517 （25 mg）1-methyl-3-[1-methyl-5-（4-methylphenyl）-1H-pyrazol-4-yl]-4-[（3S）-3-（1-piperidinyl）-1-pyrrolidinyl]-1H-pyrazolo[3,，4-d]pyrimidine,； CYP3cide； PF-04981517一管式病毒 DNA-RNAout50 次
考馬斯亮藍 R-25010g
辣根過氧化物酶10mg
D/F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
柱式軟體 RNAout50 次
120308-15植物葉綠體純化試劑盒15 次
70503A-50DNA 電泳分子量標準 (50-500 bp)50 次
腎系膜細胞生長因子5mL
DNA 酶,，Ⅱ型80U
大提柱式動物 RNAout5次
Protein A 瓊脂糖1mL
130648-200Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶200U
130995-25Cy3-dCTP 溶液,，10mM25μL
TBE 電泳液 ,10×250mL
碘5g
親和硅烷 25mL
海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒100 次
131087-100堿性磷酸酶標記親和素100mg
90702-20即用型長片段 PCR 試劑盒20 次
脫氧膽酸10g