小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株,；L-M(TK-)圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株,；L-M(TK-)圖片
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  L-M (TK-)細胞是L-M（ATCC CCL-1.2 ）細胞系的衍生株,，具有抗5-溴脫氧尿核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR）、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase mutant）的特性,，廣泛用于遺傳學,、生物化學基礎研究。也可用在體細胞雜交,、基因轉移等實驗研究中,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C36
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)圖片細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現用現配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式,，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)圖片質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實驗室擴增、凍存,，凍存的產品全部經過QC檢測,，100%進口來源，100%保證5代以內,，活力>95%,，無細菌、真菌,、支原體污染,。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題,，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)圖片操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

0.5mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個
D007-1Illumina 高通量 DNA 測序1次
130560-10Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞0.1mL×10
小鼠抗 T7 標簽單抗100μL
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷25g
三氟100mL
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )1000 支
穿刺培養(yǎng)基10 管
23-0240-100Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
60801-100柱式腐殖酸清除劑100 次
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )20L
dNTP 和引物清除劑100 次
包涵體微量純化試劑盒20 次
植物葉綠體蛋白提取試劑盒50 次
CAS5486-84-0固藍 BB 鹽5g
90510-2包涵體大量純化試劑盒2次
長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次
15mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個GSK1210151AI-BET151
（6S，9aS）-Hexahydro-6-[（4-hydroxypheICG-001
Sulfosuccinimidyl-2-（biotinamido）-ethyl-1,，3’-dithiopropionate,； Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
2-Pyrimidinamine， N-[4-（4-ami-piperidinyl）-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-（1H-indol-3-ylAZD-3463
4-（4-Chlorophenyl）piperazin-1-yl）（morpholino）methanoneAKR1C3 Inhibitor III
2-（Phosphonomethyl）pentane-1,，5-dioiNAALDase Inhibitor,， PMPA
7,，8，13,，13α-Tetradehydro-3-hydroxy-2,，9，10-trimethoxyberbinium,， Neprotin,， YatrorizineJatrorrhizine
4，4-Difluoro-8-（4-ethynylphenyl）-1,，3，5,，7-tetramethyl-4-bora-3a,，4a-diaza-s-indaceneBODIPY-Acetylene Reagent
N2-[（2S）-2-（3，5-Difluorophenyl）-2-hydroxyethanoyl]-N1-[（7S）-5-methyl-6-oxo-6,，7-dihydro-5H-dibenzo[b,，d]azepin-7-yl]-L-alaninamide； LSN-411575LY-411575
N-（6-（4-（2-（（4-methylpiperazin-1yl）methyl）-3-（trifluoromethyl）phenyl）amino）-2-oxoethyl）phenoxy）pyrimidin-4-yl）cyclopropanecarboxamideWS6
DiscoveryPak HDAC Inhibitor Set IIDiscoveryPak HDAC Inhibitor Set II
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株,；L-M(TK-)圖片10X Red Blood Cell Lysis Buffer10X Red Blood Cell Lysis Buffer
Histone H4 Peptide,， tetra-acetylated， biotin conjugateHistone H4 Peptide,， tetra-acetylated,， biotin conjugate
1-Methyl-D-tryptophan； IndoximodIDO Pathway inhibitor
雷帕霉素Rapamycin
Pifithrin-uPifithrin-u