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小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞,;SRSV/3T3圖片

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更新時(shí)間:2017-01-13 08:32:32瀏覽次數(shù):292次

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小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞,;SRSV/3T3圖片售后:收到細(xì)胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),,應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決,。

小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞,;SRSV/3T3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞,;SRSV/3T3圖片
形態(tài)特性  圓形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  這株細(xì)胞是NIH/3T3細(xì)胞用SRS小鼠腹水瘤無(wú)細(xì)胞提取物感染并在體外傳代。 在感染過(guò)的NIH/3T3細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了A型和C型病毒顆粒,。 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中有逆轉(zhuǎn)錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA,。 用這個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)BALB/c裸鼠進(jìn)行皮下接種,100%誘導(dǎo)生成纖維肉瘤,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2,。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

cis,cis-Octadeca-9,12-dienol (500 mg)Linoleic alcohol|Linoleyl alcohol,; 9Z,
SR 3677 (10 mg)N-[2-[2-(dimethylamino)ethoxy]-4-(1H-pyrazol-4-yl)phenyl]-2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-2-carboxamide
OxolinicNSC 110364|Urinox; 5-ethyl-5,8-dihydro-8-oxo-1,3-dioxolo[4,5-g]quinoline-7-carboxylic acid
Clinafloxacin (hydrochloride) (100 mg)AM1091,; 7-(3-ami-pyrrolidinyl)-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
AM80 (10 mg)Amnolake|NSC 608000|Retinobenzoic Acid|Tamibarotene,; 4-
AB-FUBINACA isomer 5 (5 mg)N-(1-ami-oxobutan-2-yl)-1-(4-fluorobenzyl)-N-methyl-1H-indazole-3-carboxamide
(R)-nitro-Blebbistatin (5 mg)R-(
2,3-Ethylone isomer (hydrochloride) (5 mg)2,3-bk-MDEA isomer; 1-(benzo[d][1,3]dioxol-4-yl)-2-(ethylamino)propan-1-one, monohydrochloride
Fluorescent Substrate for Thioredoxin V2 Assay (1 ea)Fluorescent Substrate for Thioredoxin V2 Assay
*基化組蛋白H4K20多肽Trimethyl Histone H4K20 Peptide (200 ul)
二甲基化組蛋白H3K36多肽Dimethyl Histone H3K36 Peptide (100 ul)
Z-VDVAD-FMK,, Caspase-2抑制劑(氟甲基酮)Caspase-2 Inhibitor Z-VDVAD-FMK
OAOkadaic acid
Sunitinib Maleate,, SU-11248, Sutent,, PHA-290940AD,, PNU-290940ADSunitinib Malate (Sutent)
1L-6-Hydroxymethyl-chiro-inositol2-[(R)-2-O-methyl-3-O-octadecylcarbonate]Akt Inhibitor
5-(6-Quinoxalinylmethylene)-2,4-thiazolidine-2,,4-dionePI3-K
[VO(Hhpic-O,,O) (Hhpic-O,N)(HVO-OHpic,, Trihydrate
3’-[α-Amino-p-methoxyhydrocinnamamido]-3’-deoxy-N,,N-dimethyladenosine dihydrochloridePuromycin Dihydrochloride
2-Amino-9-{[(1,3-dihydroxypropan-2-yl)oxy]methyl}-6,,9-dihydro-3H-purin-6-oneGanciclovir
Methyl -5-((2-t-butylcarbamothioyl)hydrazono)methyl)-1-(2,4-difluorophenyl)-1H-pyrazole-4-carboxylateCID 2745687
6-Benzylamino-2[(R)-(1’-ethyl-2’-hydroxyethylamino)]-9-isopropylpurine,; CYC202,; SeliciclibRoscovitine
CGP-79787; PTK 787,; ZK222584Vatalanib Dihydrochloride
AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate,; SAMeS-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate
2,PRIMA-1
1H-Zebularine植物凝膠100g
10nt 隨機(jī)引物,,0.5μg/μL5μg
CAS71010-52-1植物凝膠100g
80814-200Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL
柱式白色念珠菌 RNAout50 次
辣根過(guò)氧化物酶,,偶聯(lián)100mg
核糖核酸酶 A,牛胰25mg
TB1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL
CAS9010-34-8牛甲狀素蛋白10mg
131236-250牛血清白蛋白封堵液250mL
β -瓊脂糖酶25U
MboI500U
矮壯素100g
微量丙二醛測(cè)試盒 / 脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試盒50 T
TAE 電泳液 ,50×2500mL
131280-250Zetterqvist 固定液250 mL
130972-50凝膠法 miRNA 分離試劑盒 50 次
尿嘧啶切刻酶50U
96 孔板血液 DNAout( 離心法 )1次
Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL
超純水100mL
22-0330-1Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg
80802B-100非凍型拭子 DNA 保存液 B( 有拭子 ) 100mL

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