小鼠纖維肉瘤細(xì)胞；WEHI-13VAR圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞；WEHI-13VAR圖片
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁及懸浮生長(zhǎng)
特征特性  在放線菌素D存在下對(duì)TNF敏感 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  新生牛血清,，10%
傳代方法  1：4-1：6
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購(gòu)買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來(lái)源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

（2R,，3R，4S,，5R）-5-（6-amino-2-chloro-9H-purin-9-yl）-4-fluoro-2-（hydroxymethyl）oxolan-3-olClofarabine
2H-Pyrido[1’,，2’:4，5]pyrazino[2,，1-b][1,，3]oxazine-9-carboxamide， N-[（2,，4-difluorophenyl）methyl]-3,，4，6,，8,，12，12a-hexahydro-7-hydroxy-4-methyl-6,，8-dioxo-,， （4R，12aS）-GSK1349572
（2R,，3R,，4R，5S）-1-（2-Hydroxyethyl）-2-（-（hydroxymethyl）piperidine-3,，4,，5-triol； N-（2-Hydroxyethyl）-1-deoxynojirimycin,； BAY-1099Miglitol
（S）-4-methyl-N-（（S）-1-（（S）-4-methyl-1-（（R）-2-methyloxiran-2-yl）-1-oxopentan-2-ylamino）-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl）-2-（（S）-2-（2-morpholinoacetamido）-4-phenylbutanamido）pent*,； PR-171Carfilzomib
1-Daminozide
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluoromethyl）phenyl]-5-thiazolidinylidene]methyl]benzoic acid； CFTR（inh）-172CFTR Inhibitor-172
2-Amino-8-ethyl-4-methyl-6-（lH-pyrazol-5-yl）pyrido[2,，3-d]pyrimidin-7（8H）-one,； SAR245409XL765
（S）-N-（4-（2-（（4-morpholinophenyl）amino）pyrimidin-4-yl）phenyl）pyrrolidine-2-carboxamideXL019
2，3,，4,，5-Tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2，3-c]azepin-1-oneCID-755673
（2R,，Phleomycin
Annexin V-PE-Cy5 ReagentAnnexin V-PE-Cy5 Reagent
Protein A-AgaroseHi-Bind Protein A-AgaroseHGACL-009Hs578T人乳腺癌細(xì)胞1×1061ml/T751050 元
HRCL-005HLF-a人肺細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
EMCL-002UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
HEMCL-015HFTF人胚胎眼Tenon囊成纖維細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HICL-001TE353.SK人正常皮膚細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
HIMCL-056KG-1a人急性骨髓白血病細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
HRCL-015NCI-H2227人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
ICL-002GP-S2豚鼠皮質(zhì)細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
ICL-037TS-ES-1樹鼩胎皮成纖維樣細(xì)胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-012P388D1（IL-1）小鼠淋巴瘤細(xì)胞1×1061ml/T751000 元
RCL-022OAR-L1綿羊肺細(xì)胞1×1061ml/T751200 元
UCL-028CRFK貓腎細(xì)胞1×1061ml/T751400 元
點(diǎn)擊人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒試劑盒試劑盒元
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WHB-500WHB 真空式過濾器500ml真空式過濾器,PES(聚醚砜)膜,0.22um孔徑,滅菌材質(zhì)PS1個(gè)/包,12個(gè)/箱詢價(jià) 元
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WHB-MCE-0.22-30WHB 一次性針頭式過濾器直徑30mm針頭式過濾器,MCE膜,0.22um膜孔徑,黃色,滅菌材質(zhì)PP40個(gè)/盒,320個(gè)/箱詢價(jià) 元
HUM- iCell -e009臍靜脈平滑肌細(xì)胞1×1063892 元5×1067185 元