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參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-11 10:04:18瀏覽次數(shù):412次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類),;Pan02-CAG-tTA-4B3價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒,經(jīng)2.0ug/ml puromycin篩選,,為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細胞系,,受強力霉素Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細胞倍增時間為24小時,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法 1:4傳代,,2~3天傳代一次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
3α-Hydroxy-5β-cholan-24-oic acid, 3α-Hydroxy-5β-cholanic acid,, 5β-Cholan-24-oic acid-3α-ol,; LCALithocholic acid
2-Methoxy-5-[(1Z)-2-(3,4,,5-trimetho-xyphenyl)ethenyl]phenol,; CRC 87-09, NSC 817373Combretastatin A4
6-Chloro-9-[(4-methoxy-3,,5-dimethylBIIB 021
10-(4’-(N-diethylamino)butyl)-2-chlorophenoxazine hydrochlorideAkt Inhibitor (10-NCP)
(6R,,7R)-3-[2-(2,4-dinitrophenyl)ethenyl]-8-oxo-7-[(2-thiophen-2-ylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acidNitrocefin
5-(Thien-3-yl)-3-aminothiophene-2-carboxamideSC-514
Ammoniated Ruthenium OxychlorideRuthenium Red
N-[(1-Methyl-4-piperidinyl)methyl]-3-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amineSGI-1776
N-[4-[[[[Tetrahydro-4-(4-methoxyphenyl)-2H-pyran-4-yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]-2-furancarboxamideJW55
(S)-2-(4-chlorophenyl)-1-(4-((5R,,7R)-7-hydroxy-5-methyl-6,,7-dihydro-5H-cyclopenta[d]pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-3-(isopropylamino)propan-1-oneGDC-0068
7-AAD; NSC-239759,;EZSolution 7-Aminoactinomycin D
DiaEasy Dialyzer (800 ul) Floating racksDiaEasy Dialyzer (800 ul) Floating racks
Protein G Coated 96-well PlatesProtein G Coated 96-well Plates
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ICL-039LHBS3小菊頭蝠成纖維樣細胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-015EL4.IL-2小鼠淋巴瘤細胞1×1061ml/T751500 元
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