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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-11 09:44:11瀏覽次數(shù):358次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)小鼠雜交瘤細(xì)胞,;c7b8a3說(shuō)明書(shū)
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)),;LA1-VAP33-GFP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)),;LA1-VAP33-GFP圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá)
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
PPA (5 mg)5-phenyl-4E-pentenol,; PPA
L-hydroxy Arginine Acetate (25 mg)N5-[(hydroxyamino)iminomethyl]-L-ornithine, acetate,; L-NG-hydroxy Arginine Acetate; L-hydroxy Arginine Acetate
1,,4-PBIT (dihydrobromide) (50 mg)S,S’-1,,4-phenylene-bis(1,,2-ethanediyl)bis-isothiourea, dihydrobromide,; 1,4-PBIT (dihydrobromide)
SNAP (50 mg)N-(acetyloxy)-3-nitrosothiovaline; S-Nitroso-N-Acetyl-D,L-Penicillamine,; SNAP
Carnosol (5 mg)1,,3,,4,,9,,10,,10aS-hexahydro-5,6-dihydroxy-1,,1-dimethyl-7-isopropyl-2H-9S,,4aR-(epoxymethano)phenanthren-12-one,; Carnosol
S-Adenosylhomocysteine-d4 (1 mg)S-(5’-deoxyadenosin-5’-yl)-L-homocysteine-d4; SAH-d4,; S-Adenosylhomocysteine-d4
Stearoyl Serotonin (1 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-octadec*,; Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine (5 mg)1-(2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-imidazo[4,,5-c]pyridin-4-amine,; c3dA,; 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
PD 166326 (1 mg)6-(2,,6-dichlorophenyl)-2-[[3-(hydroxymethyl)phenyl]amino]-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one,; PD 166326
AM2201 N-(2-fluoropentyl) isomer (1 mg)(1-(2-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone; AM2201 N-(2-fluoropentyl) isomer
JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer (1 mg)(5-methoxynaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer
Nor*-d3 (5 mg)N-[4-(methoxy-d3-methyl)-4-piperidinyl]-N-phenyl-prop*,; R 30451-d3; Nor*-d3人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肌酐(Cr)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人非小細(xì)胞肺抗原(LTA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人蛋白Z(Protein Z)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人布氏菌(Brucellosis)抗體ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白細(xì)胞介素-2 受體(IL-2R)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人γ肽(Pγ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人S蛋白100P(S-100P) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人B因子(BF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛α乳清蛋白(α-La)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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