詳細(xì)介紹
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá)),;LA1-VAP33-GFP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá)),;LA1-VAP33-GFP圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá)
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
PPA (5 mg)5-phenyl-4E-pentenol,; PPA
L-hydroxy Arginine Acetate (25 mg)N5-[(hydroxyamino)iminomethyl]-L-ornithine, acetate,; L-NG-hydroxy Arginine Acetate,; L-hydroxy Arginine Acetate
1,4-PBIT (dihydrobromide) (50 mg)S,,S’-1,,4-phenylene-bis(1,2-ethanediyl)bis-isothiourea,, dihydrobromide,; 1,,4-PBIT (dihydrobromide)
SNAP (50 mg)N-(acetyloxy)-3-nitrosothiovaline; S-Nitroso-N-Acetyl-D,,L-Penicillamine,; SNAP
Carnosol (5 mg)1,3,,4,,9,10,,10aS-hexahydro-5,,6-dihydroxy-1,1-dimethyl-7-isopropyl-2H-9S,,4aR-(epoxymethano)phenanthren-12-one,; Carnosol
S-Adenosylhomocysteine-d4 (1 mg)S-(5’-deoxyadenosin-5’-yl)-L-homocysteine-d4; SAH-d4,; S-Adenosylhomocysteine-d4
Stearoyl Serotonin (1 mg)N-[2-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)ethyl]-octadec*,; Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine (5 mg)1-(2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl)-1H-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine,; c3dA,; 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
PD 166326 (1 mg)6-(2,6-dichlorophenyl)-2-[[3-(hydroxymethyl)phenyl]amino]-8-methyl-pyrido[2,,3-d]pyrimidin-7(8H)-one; PD 166326
AM2201 N-(2-fluoropentyl) isomer (1 mg)(1-(2-fluoropentyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone,; AM2201 N-(2-fluoropentyl) isomer
JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer (1 mg)(5-methoxynaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone,; JWH 081 5-methoxynaphthyl isomer
Nor*-d3 (5 mg)N-[4-(methoxy-d3-methyl)-4-piperidinyl]-N-phenyl-prop*; R 30451-d3,; Nor*-d3人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肌酐(Cr)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人非小細(xì)胞肺抗原(LTA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人蛋白Z(Protein Z)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人布氏菌(Brucellosis)抗體ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白細(xì)胞介素-2 受體(IL-2R)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人γ肽(Pγ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人S蛋白100P(S-100P) ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人B因子(BF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛α乳清蛋白(α-La)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝