小鼠肝癌瘤株,；H22圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠肝癌瘤株,；H22圖片
形態(tài)特性  實(shí)體瘤,、腹水瘤
生長特性 體內(nèi)生長
特征特性  1952年，前蘇聯(lián)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所以C3HA小鼠誘發(fā)的H22肝癌實(shí)體瘤的瘤細(xì)胞懸液，昆明種小鼠皮下移植后,，轉(zhuǎn)腹水瘤,。經(jīng)檢測，該瘤株在Km小鼠,、615小鼠,、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠體內(nèi)可以形成實(shí)體瘤和腹水瘤,。 
培養(yǎng)條件   -
傳代方法  制備成細(xì)胞懸液接種至615等小鼠,。
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  -
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

lambda(λ)DNA5μg
丁酰膽堿酯酶500U
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-APC·7-AAD） 20 次
CAS98185-20-7S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石25mg
100830-30低 pH 緩沖液套裝30 次
組蛋白 3.1 小鼠單抗1000μL
氯化膽堿100g
多聚半乳糖醛1g
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )250 T
CAS9025-82-5磷酸二酯酶Ⅰ100U
140646-100魯米諾血跡鑒定試劑盒100mL
60305-250真菌 RNAout250 次
NotI150U
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg
一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次
22-0070-0.2Actin-Tracker Green( 微絲綠色熒光探針 )0.2mL
17-012-9610 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )96 支
胚胎裂解液1mL
Bst DNA 聚合酶,，全長500U
PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg
血液保存和 DNA 純化套裝100 次
23-0650-1SB203580(p38MAPK 抑制劑 )1mg
80803-50柱式動(dòng)物線粒體 DNAout,，PCR 50 次人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D（MICD）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰多肽(PP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2) ELISA試劑盒48T/96T試劑盒組裝/原裝
人維生素B6(VB6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人內(nèi)皮素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人黃曲酶毒素（AFT）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人庚型肝炎毒IgM(HGV-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝