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詳細(xì)介紹
BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞；BNL 1ME A.7R.1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞；BNL 1ME A.7R.1圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞由正常肝上皮細(xì)胞BNL CL.2經(jīng)甲基膽蒽誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化而建立,在0.3%的瓊脂中可生長(zhǎng),，鼠痘病毒陰性,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:8傳代，每周2~3次換液,。
傳代情況 P14
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購(gòu)買(mǎi)到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%,，無(wú)細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。
mRNA 提取試劑盒25 次
藍(lán)膠瓊脂糖50mL
130647-200尿嘧啶糖基化酶抑制劑200U
120630-25Fluorescein-12-dUTP 溶液，1mM25μL
TB1 菌種1mL
碘硝基四唑紫嘌呤250mg
青鏈溶液100mL
螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒100 次
131086-2辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素2mg
140590-15核苷酸類似物法易錯(cuò) PCR 試劑盒15 次
脫落酸25mg
反玉米素50mg兔子蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人組織蛋白去乙?；?HD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰島細(xì)胞抗體(ICA)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管生成素樣蛋白2（ANGPTL2）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人腺毒IgM(ADV-IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人傷寒抗原(St-Ag)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人內(nèi)毒素(ET)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人磷酸肌酸激酶(CPK)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人顆粒溶素(granulysin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人睪酮(T)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
琥珀酸 ( 丁二酸 )25g
Protein G 磁珠1mL
CAS9037-22-3支鏈淀粉1g
60603-20即用型藍(lán)白 T 載體 A 型 (T7-SP6,，有 MCS)20 次
顯影粉1袋
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