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小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3圖片

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更新時間:2017-01-11 09:06:25瀏覽次數(shù):259

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產(chǎn)品簡介

小鼠胚胎成纖維細胞,;BALB/C 3T3圖片售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決,。

詳細介紹

小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3圖片
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,;2~3天1次,。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  -
同工酶 
染色體  47~52
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。

多核苷酸磷酸化酶100mg
CAS87-51-4吲哚 -3- 1g
80807B-50動物細胞裂解液 B50mL
熒光素 (FITC) 標記親和素5mg
聚乙烯聚吡咯烷酮50g
水楊酸25g
ATP 溶液,,2.5mM2mL
CAS91079-38-8蛋白胨250g
131123-10考馬斯亮藍 G-25010g
柱式 BAC DNAout 50 次
Lipoic acid( 抗氧化劑 )0.5g
脂肪酶5g
熒光法死細胞檢測試劑盒1000 次大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠活性氧簇(ROS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬孕激素(P)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬藍耳抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠胰島素原(PI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
CAS64-75-5鹽酸四環(huán)素5g
130878-1可逆性鋅染試劑盒1套
α-Tubulin 小鼠單抗30μL
M13 噬菌體單鏈基因組 DNAout50 次
甲苯胺藍5g
醛縮酶測試盒24 T
裂殖酵母化學感受態(tài)細胞制備試劑盒20 次

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