人肝內(nèi)膽管癌細胞系；LICCF圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 人肝內(nèi)膽管癌細胞系,；LICCF圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開,。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2,、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,，購買到貨后，由我們實驗室擴增,、凍存,，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi),，活力>95%，無細菌,、真菌,、支原體污染。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)。

組蛋白25g
氯化銨 T5g
葡聚糖凝膠 G-50 中顆粒25g
過氧化氫測試盒50 T
CAS9001-78-9堿性磷酸酶 ( 大腸桿菌 )5mg
111007-500MALDI 蛋白樣品處理試劑盒500 次
60305-50真菌 RNAout50 次
Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )5mg
5-FITC1g
5-Carboxyfluorescein100mg
一站式長效期 SDS-PAGE 電泳套裝 (>30KD)30 次
22-0060-100Acridine Orange(AO)100mg
17-011-9610 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌長尖 )96 支
Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 )5mg
Bst DNA 聚合酶,，大片段800U
Pifithrin-a(p53 抑制劑 )5mg
超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測試劑盒（ECL）250mL
23-0640-100Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )100μg 
131206-4大提柱式酵母 DNAout4次植物維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠細胞色素C(Cyt-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠生長因子(GH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠15-脂氧合酶（15-LOX）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
RNase-free CTAB 溶液 ,20%100mL
超快非醇核酸沉淀劑30 次
真菌 RNAout50 次
絲裂 C 溶液 ,5mg/mL10mL