詳細(xì)介紹
人舌鱗狀癌細(xì)胞,;CAL 27圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人舌鱗狀癌細(xì)胞,;CAL 27圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系于1982年建立,,從一位56歲白種男性的病變舌中間部分取得,該細(xì)胞具高密度顆粒狀胞漿,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR AMEL:X,X,;CSF1PO:10,12;D12S391:18.3,20,;D13S317:10,11,;D16S539:11,12;D18S51:13,13,;D19S433:14,15.2,;D21S11:28,29;D2S1338:23,24,;D2S441:10,11.3,;D3S1358:16,16;D5S818:11,12,;D6S1043:12,12,;D7S820:10,10;D8S1179:13,15,;FGA:25,25,;Penta D:9,10,;Penta E:7,7;TH01:6,9.3,;TPOX
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
18-0740-24總抗氧化能力測(cè)試盒 ( 比色法 )24 T
70907-100去離子甲酰胺100mL
TG1 菌種1mL
非凍型組織 DNA 保存液250mL
Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯10g
植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 K-30100g
100831-1005- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)100mg
130834-500RNase 抑制劑 ( 豬源 )500U
牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,,2mg/mL1mL
Calcein M 100mg
非凍型血液 DNA 保存液250mL
Protein G 瓊脂糖1mL
120505-500Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶500U
130997-10Sephadex G50 介質(zhì)10mL
TCEP 鹽酸膦1g
電泳 TEMED1.5mL
TBE 電泳液 ,10×250mL游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素(irGH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人疊氮胸苷(AZT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人表皮生長(zhǎng)因子受體2(Her2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β1腎上腺素受體抗體(β1-AR)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人H1N1 抗體(IgG)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
DNA 修復(fù)混合液 30 次
131090-10中性親和素蛋白10mg
130605-50即用型多重 PCR 試劑盒50 次
脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )25mg
放線酮溶液 ,100mg/mL1mL
甲叉雙丙烯酰胺25g
M13mp18DNA10μg