詳細介紹
人胰腺癌細胞系,;SW 1990圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 人胰腺癌細胞系,;SW 1990圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1978年從胰腺外分泌腺的胰腺腺癌II期患者的脾轉(zhuǎn)移灶中建立了SW 1990細胞株。 報道該細胞的植板率為29%,。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2,。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 P(76+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12,;D13S317:8,12,;D16S539:13;D18S51:13,;D19S433:13,15,;D21S11:31;D2S1338:23,;D3S1358:16,;D5S818:12,13;D7S820:9,10,;D8S1179:11,14,;FGA:26;TH01:9.3,;TPOX:8,9,;vWA:17
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑 )5mg
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次
140587-250B-5 固定液250 mL
三合一 RNA 上樣液 ( 無 EB) 1.5mL
N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸10g
CAS9050-94-6瓊脂糖凝膠 2B100mL
90314-50柱式尿液 DNAout50 次
一站式 Blue Native PAGE 電泳套裝30 次
Vent DNA 聚合酶100U
堿性磷酸酶 ( 牛小腸 )1mg
核糖核酸酶 H600U
130506-1.5海藻糖溶液,,1.5M,PCR 1.5mL
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 4B100mL
角膜上皮細胞生長因子5mL
磁珠植物 DNAout50 次
β- 瓊脂糖酶Ⅰ100U
131007-100RIPA 裂解液 ( 中 )100mL
鳥苷5g
柱式土壤 DNAout50 次
CAS67-48-1氯化膽堿100g
柱式血液 DNAout200 次
麥芽提取物100g
考馬斯亮藍 R-250 染液250mL
聚乙二醇 12000250gL-2-Aminoadipic acidL-2-氨基己二酸1118-90-7
Benzoyl peroxide過氧化酰94-36-0
MERRIFIELD RESIN基化聚乙樹脂 1%DVB交聯(lián)55844-94-5
NA5-溴-2-吡啶醇
POLYPHYLLIN D重樓皂甙C50773-41-6
Methylmagnesium chloride基化鎂676-58-4
1,3,5-Trimethoxybenzene1,,3,,5-三氧基621-23-8
ZINC FLUORIDE TETRAHYDRATE化鋅,四水13986-18-0
Darifenacin hydrobromide氫溴酸達非那新133099-07-7
Curcumol姜黃醇4871-97-0
3-SULFOPROPYL METHACRYLATE, POTASSIUM SALT3-磺酸丙基基丙酸鉀31098-21-2
4-Chlorophenylacetylene4-乙炔873-73-4
1-Chlorotetradecane代十四烷2425-54-9
Brompheniramine hydrogen maleate馬來酸溴那敏980-71-2
DIPROPYL PHTHALATE鄰二酸二丙酯131-16-8
Naphazoline hydrochloride萘唑啉酸550-99-2
TERT-BUTYLMAGNESIUM CHLORIDE叔丁基化鎂677-22-5
NA硅鉬粉
3-Aminocrotononitrile3-氨基巴豆1118-61-2