Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-552*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。

Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞；231-Cas9-552*現(xiàn)貨直銷,，免費快遞送貨上門,。公司供應各種細胞株，細胞系,，種類齊全,，現(xiàn)貨，質量保證,，公司所有產品僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書,。

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin,，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:2~1:4傳代,；每周2~3次,。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13,；D12S391：17,18,；D13S317：13,13,；D16S539：12,12；D18S51：11,16,；D19S433：11,14,；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21,；D3S1358：16,16,；D5S818：12,12；D6S1043：18,18,；D7S820：8,9；D8S1179：13,13,；FGA：22,23,；Penta E：11,11；TH01：7,9.3,；TPOX：8,9,13,；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸,。收到細胞時,，若干冰已經*融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰,，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞,，切不可將細胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮,。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度,。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,，周三，周五更換培養(yǎng)基,。
注意：*次植入后,，在6-16小時內更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞,。到達客戶手中,，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細胞的真實性,，支持客戶檢測對應的biomarker，（如證明細胞錯誤,，全額退款,。）公司針對每株細胞，鑒定gene background,，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>

氯化血紅素1g
抑肽酶2mg
堿性磷酸酶測試劑盒48 T
CAS9002-09-9酪氨酸脫羧酶25U
100807-100杜氏 PBS 緩沖液 ,10×100mL
130843-50分枝桿菌 RNAout50 次
萘啶酮酸5g
8- 環(huán)戊基 -1,3- 二丙基黃嘌呤25mg
Congo Red 100mg
蝸牛酶干粉5g
22-0160-100DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
17- μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝 )100 支
葡激酶100μg
百萬堿基真菌 DNAout10 次
Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g
末端脫氧核苷轉移酶 (TdT)500U
23-0740-1Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
60707-250細菌 DNAout250 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL
超敏化學發(fā)光（HRP）檢測試劑盒 2.0 250mL
RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL
鹽酸萬古霉素溶液 ,50mg/mL10mL
18-0110-50NF-κB 激活－核轉運檢測試劑盒50 次
101208-100DNA  Tris HCl,，1M,，pH9.0100mLEthyl pyruvate丙酸乙酯617-35-6
Sodium 3-(pyridin-2-yl)-1,2,4-triazine-5,6-diyl]bis(benzene-4,4'-sulphonate) hydrate菲啰嗪69898-45-9
ISOSTEARIC ACID異硬脂酸2724-58-5
(ETHYLENEDINITRILO)TETRAACETIC ACID, TRISODIUM SALT HYDRATE乙四乙酸三85715-60-2
Dimethyl fumarate富馬酸二酯624-49-7
GADOLINIUM金屬釓7440-54-2
DI-T-BUTYLCYCLOHEXYLPHOSPHINECyclohexyldi - T型丁基膦436865-11-1
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE SULFATE二乙基對硫酸6065-27-6
N-ACETYLMURAMIC ACIDN-乙酰胞壁酸10597-89-4
2-Bromo-2',4'-difluoroacetophenoneα-溴代-2,4-二乙102429-07-2
1-Hydroxy-2,3-dimethylbenzene2,3-二酚526-75-0
Octanoyl chloride酰111-64-8
2-Phenylacetoacetonitrile2-基乙酰基乙4468-48-8
2-Amino-4-chloro-5-methylbenzenesulfonic acid2-氨基-4--5-基磺酸88-51-7
11-(1-Piperazinyl)-dibenzo[b,f][1,4]thiazepine dihydrochloride11-嗪-二并[b,f][1,4]硫氮雜卓酸111974-74-4
L(-)-Camphorsulfonic acidL-(-)樟腦磺酸35963-20-3
(S)-(+)-3,3-Dimethyl-2-butylamine(S)-3,3-二基-2-丁胺22526-47-2
Secondary carbon primary amine extraction agent仲碳伯胺萃取劑
Gabapentin-lactam3,3'-亞基-4-丁內酰胺64744-50-9
L-Methionine methyl ester hydrochlorideL-蛋氨酸酯酸2491-18-1