詳細介紹
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株,;PG-LH7價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株,;PG-LH7價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 母系人肺巨細胞癌PG,,單細胞克隆法分離鑒定得到的低轉(zhuǎn)移細胞株;裸鼠體內(nèi)成瘤率100%,,肺轉(zhuǎn)移率44%,,淋巴轉(zhuǎn)移率50%。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,;2~3天1次,。
傳代情況 P6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12,,13,;D13S317:12;D16S539:13,;D18S51:14,;D19S433:13,15.2,;D21S11:29,;D2S1338:18;D3S1358:16,,17,;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:13,,15,;FGA:19;TH01:7,;TPOX:11,,12;vWA:18,;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
雪旺細胞生長因子5mL
IPTG 干粉2.5g
21-0450-5周細胞生長因子5mL
17-004-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Protein A 瓊脂糖1mL
BL21-CodonPlus-RP 菌種1mL
NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
動物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )15 次
23-0570-100Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
70901-50柱式真菌 DNAout50 次
RNase A 溶液,,10mg/mL1.5mL
超雜交液 ( 芯片 )10mL
硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
131012-1螢火蟲熒光素1mL
80934D-10TE 緩沖液,,PH8.510mL
Southern 細菌 (G+)DNAout10 次
dITP 溶液,2.5mM2mL
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL
C600 菌種1mL
130405-10克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
90212-50高載量 PCR 片段純化試劑盒50 次Difenoconazole環(huán)唑119446-68-3
Alantolactone土木香內(nèi)酯546-43-0
Disodium fumarate富馬酸17013-01-3
Clorpyrifos毒死蜱2921-88-2
Zinc acetate醋酸鋅557-34-6
DIOSMETIN香葉木素520-34-3
3,3',4',5,7-Pentahydroxyflavone槲皮素117-39-5
TRIS(4,6-DIMETHYL-3-SULFANATOPHENYL)PHOSPHINE TRISODIUM SALT HYDRATE三(2,4-二基基)磷化氫-5,5',5''-三磺酸三443150-11-6
D-(+)-SORBOSED-山梨糖3615-56-3
PERFLUORO-2-METHYLPENTANE2-三基-1,1,1,2,3,3,4,4,5,5,5-十一代烷355-04-4
n-Propyl ether丙111-43-3
P-TOLUALDEHYDE 2,4-DINITROPHENYLHYDRAZONE對-DNPH2571-00-8
VARIAMINE BLUE B凡拉明藍B3566-44-7
Hydroxypropyl acrylate丙酸羥丙酯25584-83-2
SODIUM HYDROGEN FUMARATE富馬酸氫5873-57-4
Organic carbon(TOC) in water總有機碳(TOC)標準溶液
Potassium hydride氫化鉀7693-26-7
Dicyclohexylchlorophosphine二環(huán)己基化膦16523-54-9
Chloromethyl ethyl ether基3188-13-4
LAURIC ACID SODIUM SALT月桂酸629-25-4
ophiopogonin B麥冬皂苷 B38971-41-4