詳細(xì)介紹
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;NTERA-2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;NTERA-2圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是1980年從Tera-2細(xì)胞系的裸鼠異種移植瘤中分離建立的,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 該細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要維持較高的密度,,T75瓶中至少接種5×106個(gè)細(xì)胞。每2~3天傳代1次,。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,,Y;CSF1PO:10,,12,;D13S317:13;D16S539:11,,12,,13;D18S51:14,;D19S433:14,,15.2;D21S11:30,,31,;D2S1338:22,25,;D3S1358:16,;D5S818:9,12,;D7S820:10,,12;D8S1179:13,,15,;FGA:23;TH01:9.3,;TPOX:8,;vWA:18,,19;
同工酶
染色體 62~67
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購(gòu)買(mǎi)到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
改良V-P培養(yǎng)基/V-P Medium Modified蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人支氣管上細(xì)胞英文名稱:16HBE
豬脫氧膽酸/豬去氧膽酸/異去氧膽酸/二羥基膽烷酸/Hyodeoxycholic acidBR,,98%10/25/100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基/Columbia Agar Medium營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)基及溶血試驗(yàn),,梭菌的檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
定影粉10包(10 × 250 ml)國(guó)產(chǎn)
腦浸粉(牛)/牛腦浸粉/牛腦提取物/Brain infusion powderBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肝竇內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
西蒙氏枸櫞酸鹽發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2
QGY-7703(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PBS(10X)規(guī)格:500mlgersionGGTI 298 (trifluoroacetate salt) (5 mg)methyl (4-(((R)-2-amino-3-mercaptopropyl)amino)-2-(naphthalen-1-yl)benzoyl)leucinate 2,2,2-trifluoroacetate
ABT-199 (5 mg)GDC 0199; 4-
ONX 0914 (25 mg)PR 957,; N-
Ezetimibe (50 mg)Ezetrol|SCH 58235|Zetia,; (3R,4S)-1,4-fluorophenyl-3-[(3S-3-4-fluorophenyl)-3-hydroxypropyl]-4-(4-hydroxyphenyl)-2-azetidinone
AB-CHMINACA metabolite M2 (1 mg)N-[[1-(cyclohexylmethyl)-1H-indazol-3-yl]carbonyl]-L-valine
PX 2 (5 mg)FU-PX; (R)-N-(1-ami-oxo-3-phenylpropan-2-yl)-1-(5-fluoropentyl)-1H-indazole-3-carboxamide
1,2-O-Dihexadecyl-rac-glycerol (500 mg)2,3-bis(hexadecyloxy)-1-propanol
Actinonin(-)-Actinonin|Ro 06-1467,; (2R)-N4-hydroxy-N1-[(1S)-1-[[(2S)-2-(hydroxymethyl)-1-pyrrolidinyl]carbonyl]-2-methylpropyl]-2-pentyl-butanediamide
SR 3677 (25 mg)N-[2-[2-(dimethylamino)ethoxy]-4-(1H-pyrazol-4-yl)phenyl]-2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-2-carboxamide
CX-4945Silmitasertib,; 5-[(3-chlorophenyl)amino]-benzo[c]-2,6-naphthyridine-8-carboxylic acid
GW 441756 (5 mg)1,3-dihydro-3-[(1-methyl-1H-indol-3-yl)methylene]-2H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-2-one
Hexanolamino PAF C-16 (25 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphoryl(N,N,N-trimethyl)hexanolamine
N-Acetylagmatine (acetate salt) (1 mg)Monoacetylagmatine; N-(4-guanidinobutyl)acetamide acetate
cis-Tramadol-d6 (hydrochloride) (1 mg)Contramal-d6|Tramal-d6|Ultram-d6|Zydol-d6,; rel-2R-[(dimethylamino)methyl]-1R-(3-methoxyphenyl)-cyclohexanol-d6, monohydrochloride
Enniatin ComplexEnniatin Complex
NCI-H661(人大細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MFC(小鼠胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HL-60/急性髓性白血病細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
DAB Kit/DAB顯色試劑盒20m、60ml國(guó)產(chǎn)
小鼠層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
AAV-293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL