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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>> EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,;KMY0907圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-05 10:19:16瀏覽次數(shù):271次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,;KMY0907圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,;KMY0907圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一無精癥男性患者的外周血,。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代,;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時,,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。
5-MAPB (hydrochloride) (10 mg)1-(benzofuran-5-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride,; 5-(2-Methylaminopropyl)Benzofuran; 5-MAPB (hydrochloride)
5-methoxy-α-Ethyltryptamine (10 mg)α-ethyl-5-methoxy-1H-indole-3-ethanamine,; 5-MeO-α-ET,; 5-methoxy-α-Ethyltryptamine
JWH 146 (10 mg)(1-heptyl-5-phenyl-1H-pyrrol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 146
Gatifloxacin (10 g)1-cyclopropyl-6-fluoro-1,,4-dihydro-8-methoxy-7-(3-methyl-1-piperazinyl)-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid,; AM 1155|BMS 206584-01|PD 135432; Gatifloxacin
JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (10 mg)(1-(4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methoxynaphthalen-1-yl)methanone,; JWH 081 N-(4-hydroxypentyl) metabolite
5-(N-ethyl-N-isopropyl)-Amiloride (10 mg)3-amino-N-(aminoiminomethyl)-6-chloro-5-[ethyl(1-methylethyl)amino]-2-pyrazinecarboxamide,; EPIA|L-593,754|MH 12-43,; 5-(N-ethyl-N-isopropyl)-Amiloride
PJ-34 (hydrochloride) (1 mg)N-(5,,6-dihydro-6-oxo-2-phenanthridinyl)-2-(dimethylamino)-acetamide, monohydrochloride,; PJ-34 (hydrochloride)
JNJ-1661010 (25 mg)N-phenyl-4-(3-phenyl-1,,2,4-thiadiazol-5-yl)-1-piperazinecarboxamide,; JNJ-1661010Citrate Buffer(100x)/檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 100x)100ml國產(chǎn)
小鼠結(jié)締組織纖維細(xì)胞英文名稱:LTK
786-O [786-0], 人腎透明腺細(xì)胞
人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞英文名稱:HEC-1-B
BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人腺細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-453
UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠角膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
DNA酶瓊脂/脫氧核糖核酸酶瓊脂/Dnase Agar用于細(xì)菌DNA酶檢測100克國產(chǎn)/進(jìn)口
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
UVM培養(yǎng)基/UVM Medium李氏菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人肺上細(xì)胞英文名稱:L132
煌綠糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠糖膽鹽增菌液/BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Cooked Meat Medium Base用于厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
硝酸鹽氰化培養(yǎng)基基礎(chǔ)/KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗100克國產(chǎn)/進(jìn)口
SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml,、18ml國產(chǎn)
NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
L-O2(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞gersion
PPADS (sodium salt) (10 mg)4-[2-[4-formyl-5-hydroxy-6-methyl-3-[(phosphonooxy)methyl]-2-pyridinyl]diazenyl]-1,3-benzenedisulfonic acid,, tetrasodium salt,; Pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2’,4’-disulfonic acid,; PPADS (sodium salt)
Diazoxide (100 mg)7-chloro-3-methyl-1,,1-dioxide-2H-1,2,,4-benzothiadiazine,; NSC 64198|NSC 76130|SRG 95213; Diazoxide
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