永生化人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞系；ECDHCC-1價格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,，購買到貨后,，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進(jìn)口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。

永生化人肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞系；ECDHCC-1價格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細(xì)胞,，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,，37℃孵育,，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液,?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min,，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液,，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研,，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,，其特征特性尚未公開,。 
培養(yǎng)條件   10%FBS
傳代方法  無
傳代情況 1:3傳代，3-4天傳1次
凍存條件  C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR  陰性
同工酶 
染色體  未做
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細(xì)胞處理：
1,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

一管式病毒 DNAout    200 次
一管式病毒 DNAout    50 次
一管式病毒 DNA-RNAout    50 次
一管式病毒 RNAout    200 次
一管式病毒 RNAout    50 次
一管式點(diǎn)突變試劑盒    10 次
一管式拭子 DNAout    100 次
一管式拭子 DNAout    20 次
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒    10 次
一管式植物 DNAout    50 次
一管式植物 DNAout    500 次
一氧化氮合成酶測試盒    24 T
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學(xué)法 )    100 T
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )    25 T
一站式 Blue Native PAGE 電泳套裝    30 次
一站式 CTAB-PAGE 電泳套裝    30 次
一站式 DNA 非變性 PAGE 電泳套裝    30 次2-Atorvastatin
Sulfosuccinimidyl-2-（biotinamido）-ethyl-1，3’-dithiopropionate,； Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
（R）-4-（8-cyclopentyl-7-ethyl-5-methyl-6-oxo-5,，6，7,，8-tetrahydropteridin-2-ylamino）-3-methoxy-N-（1-methylpiperidin-4-yl）benzamideBI-2536
（2R,，4S）-ethyl 2-ethyl-4-（methoxycarbonyl）-6-（trifluoromethyl）-3，4-dihydroquinoline-1（2H）-carboxylate,； CP-529414,， CP529414， CP 529414Torcetrapib
4-Pyridinecarboxylic acid,， 2-phenylhydrazide,； NSC-14613PluriSIn 1
E）-N-[（4-Hydroxy-3-methoxyphenyl）methyl]-8-methyl-6-nonenamideCapsaicin
4-[[（2R，3S,，4R,，5S）-3-（3-chloro-2-fluorophenyl）-4-（4-chloro-2-fluorophenyl）-4-cyano-5-（2，2-dimethylpropyl）pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methoxybenzoic acidRG7388
（2E）-N-hydroxy-3-[4-[[（2-hydroxyethyl）[2-（1H-indol-3-yl）ethyl]amino]methyl]phenyl]-2-propenamide,； Dacinostat,； NVP-LAQ824LAQ824
8-Hydroxy-7-[（6-sulfo-2-naphthyl）azo]-5-quinolinesulfonic acidNSC-87877
2-（（4-Pyridyl）methyl）amino-N-（3-（trifluoromethyl）phenyl）benzamideAAL-993
Yeast Mitochondria （S. cerevisiae）Yeast Mitochondria （S. cerevisiae）
Heparin SepharoseHeparin Sepharose
Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Protease Free,， pH 7.0Bovine Serum Albumin – Heat Shock,， Protease Free， pH 7.0
NADH Standard （1,。5 mg）NADH Standard
一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝    30 次
一站式 GST 標(biāo)記蛋白質(zhì)微量純化套裝    20 次