詳細介紹
人胚肺轉(zhuǎn)化細胞;SL-1價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人胚肺轉(zhuǎn)化細胞,;SL-1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
小鼠中性粒細胞分離液 1.100 200mL
小鼠瘤細胞分離液 1.070 200mL
心肌黃酶 1KU
心肌細胞生長因子 5mL
甲基 β 葡糖苷 1g
甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG) 5g
新生霉素 250mg
新生霉素溶液 ,50mg/mL 5mL
星形膠質(zhì)細胞生長因子 5mL
星形細胞生長因子 5mL
胸腺嘧啶 5g
胸腺嘧啶核苷 5g
溴酚藍 5g
溴化乙錠 (EB) 100mg
溴化乙錠干粉 (EB) 1g5(6)-EpETE methyl ester (500 ug)(±)5(6)-epoxy-8Z,,11Z,14Z,,17Z-eicosatetraenoic acid,, methyl ester; 5,,6-epoxy Eicosatetraenoic Acid methyl ester|5,,6-EEQ methyl ester; 5(6)-EpETE methyl ester
CJ-023423 (25 mg)RQ-00000007,; N-[[2,4-(2-ethyl-4,6-dimethyl-1H-imidazo[4,5-c]pyridin-1-yl)phenylethylamino]carbonyl]-4-methyl-benzenesulfonamide
Triacsin C (1 mg)FR 900190|WS1228A,; nitrosohydrazone-2E,4E,7E-undecatrienal
(±)8-HEPE (50 ug)(±)-8-hydroxy-5Z,9E,,11Z,,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid,; (±)8-HEPE
9(S)-HETE (25 ug)9S-hydroxy-5Z,,7E,,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid,; 9(S)-HETE
FeTMPyP (100 mg)Fe(III)tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride,; FeTMPyP
Cisplatin (100 mg)CDDP|Cisplatinum|NSC 119875|cis-Diamminedichloroplatinum; (SP-4-2)-diamminedichloro-platinum
Bromosporine (1 mg)ethyl (3-methyl-6-(4-methyl-3-(methylsulfonamido)phenyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl)carbamate
ML-228 (50 mg)CID-46742353,; N-([1,1’-biphenyl]-4-ylmethyl)-6-phenyl-3-(2-pyridinyl)-1,2,4-triazin-5-amine
Pyrazolam (1 mg)8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepine
Ivacaftor (1 mg)Kalydeco|VX 770,; N-
FG-4592 (5 mg)ASP1517|Roxadustat; N-[(4-hydroxy-1-methyl-7-phenoxy-3-isoquinolinyl)carbonyl]-glycine
YZ9 (10 mg)7-hydroxycoumarin-3-Carboxylic Acid ethyl ester,; 7-hydroxy-2-ozo-2H-1-benzopyran-3-carboxylic acid, ethyl ester
溴化乙錠清除劑 100 次
溴化乙錠溶液 ,10 mg/mL 1.5mL
溴甲酚綠 1g
溴甲酚紫 5g
雪旺細胞生長因子 5mL