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人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17價格

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更新時間:2017-01-05 09:48:38瀏覽次數(shù):285

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

人胚腎細胞(SV40T基因修飾),;293T/17價格售后:收到細胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題(如污染,死亡,,快遞運輸?shù)仍颍r,,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決,。

詳細介紹

人胚腎細胞(SV40T基因修飾),;293T/17價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內,活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  293細胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉染效率的衍生株稱為293T,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質胎牛血清,,10%
傳代方法  消化5-15分鐘。1:4-1:8,。3天內可長滿,。
傳代情況 P(17+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。

細胞表面蛋白分離試劑盒    8次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 594)    20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 594)    50 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC)    20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC)    50 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE)    20 次
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE)    50 次
細胞核蛋白提取試劑盒    50 次
細胞核微量制備試劑盒    50 次
細胞計數(shù)液 (Vi-CELL 儀 )    100 次
細胞色素 C    100mg
細胞松弛素 B    1mg
細胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL    0.1mL
細胞周期與凋亡檢測試劑盒(PI 法)    50 次
細胞株系列    --
JWH 398 7-chloronaphthyl isomer (5 mg)(7-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone,; JWH 398 7-chloronaphthyl isomer
JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer (10 mg)(6-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer
bk-DMBDB (hydrochloride) (50 mg)1-(1,,3-benzodioxol-5-yl)-2-(dimethylamino)-1-butanone,, monohydrochloride; Dibutylone,; bk-DMBDB (hydrochloride)
Arachidonic Acid methyl ester (250 mg)5Z,,8Z,11Z,,14Z-eicosatetraenoic acid,, methyl ester; Methyl Arachidonate; Arachidonic Acid methyl ester
Eicosatetraynoic Acid (25 mg)5,,8,,11,14-eicosatetraynoic acid,; ETYA,; Eicosatetraynoic Acid
Oleoyl Ethanolamide (5 mg)N-(2-hydroxyethyl)-9Z-octadecenamide; OEA|Oleic Acid Ethanolamide,; Oleoyl Ethanolamide
5(S),,6(R)-Lipoxin A4 (250 ug)5S,6R,,15S-trihydroxy-7E,,9E,,11Z,,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),,6(R),,15(S)-TriHETE|5(S),6(R)-LXA4,; 5(S),,6(R)-Lipoxin A4
RCS-4 M11 metabolite (5 mg)5-(3-(4-hydroxybenzoyl)-1H-indol-1-yl)pentan-2-one; RCS-4 N-(4-oxo-pentyl)phenol metabolite,; RCS-4 M11 metabolite
Clozapine (500 mg)8-chloro-11-(4-methyl-1-piperazinyl)-5H-dibenzo[b,,e][1,4]diazepine,; Azaleptin|HF 1854|Fazaclo|Iprox|Sizopin,; Clozapine
IDE2 (5 mg)1-(2-cyclopentylidenehydrazide)-heptanedioic acid; IDE2
ML-265 (1 mg)6-
細菌 DNAout    250 次
細菌 DNAout    50 次
細菌 RNAout    100 次
細菌 RNAout    250 次
細菌蛋白酶抑制劑    10mL
細菌膜蛋白質微量提取試劑盒    50 次

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