人肝永生化細胞,；THLE-3說明書現(xiàn)貨直銷，免費快遞送貨上門,。公司供應(yīng)各種細胞株,，細胞系，種類齊全,，現(xiàn)貨,，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細閱讀本說明書。

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)細胞系是正常肝細胞用SV40大T抗原轉(zhuǎn)染得到,。 將含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入兼嗜性包裝細胞株P(guān)A317中病毒。 THLE-2 and THLE-3表達正常成人肝上皮細胞特征性的表型,。 當(dāng)注射到無胸腺裸鼠中時,，它們不成瘤，具有接近二倍體的核型,，不表達甲胎蛋白,。 THLE-2 and THLE-3將benzo[a]pyrene, N-nitrosodimet 
培養(yǎng)條件   Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號CC3170)。 套裝包含了500毫升基本培養(yǎng)基及分別凍存的添加劑,，我們不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine,。
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2,。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細胞時,，若干冰已經(jīng)*融化,，請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰,，請立即將細胞放入液氮中保存待用,，請按條件貯存細胞,，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研,。
儲存：液氮,。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,，這取決于細胞生長的速度,。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三,，周五更換培養(yǎng)基,。
注意：*次植入后，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞,。到達客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為）,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,，（如證明細胞錯誤，全額退款,。）公司針對每株細胞,，鑒定gene background，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細胞的真實性,，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。戊巴比妥鈉    5g
戊二醛，25% 水溶液    10mL
戊二醛二甲鈉緩沖固定液    250 mL
戊二醛磷酸緩沖固定液    250 mL
X 光片 (5×7 英寸 )    1盒
X 光片 (8×10 英寸 )    1盒
X33 酵母菌種    1mL
Xa 因子蛋白酶    25μg
Xa 因子蛋白酶    50μg
XbaI    1500U
X-Gal 干粉    0.5g
X-Gal 溶液,，20mg/mL    10mL
XhoI    2000U
XL-10 gold 菌種    1mL
XL10-Gold 感受態(tài)細胞    0.1 mL×10
REV 5901 （10 mg）,。alpha。-pentyl-3-（2-quinolinylmethoxy）-benzenemethanol,； REV 5901
LY171883 （100 mg）1-[2-hydroxy-3-propyl-4-[4-（1H-tetrazol-5-yl）butoxy]phenyl]-ethanone,； LY171883
CAY10401 （500 ug）1-oxazolo[4，5-b]pyridin-2-yl-9-octadecyn-1-one,； CAY10401
Colorimetric COX Assay Potassium Hydroxide （1 ea）Potassium Hydroxide,； Colorimetric COX Assay Potassium Hydroxide
L-Thiocitrulline （hydrochloride） （500 mg）N5-（aminothioxomethyl）-L-ornithine （dihydrochloride）； L-Thiocitrulline （hydrochloride）
Peroxynitrite （1 ml）peroxynitrous acid,， sodium salt,； Sodium Peroxynitrite； Peroxynitrite
DAN-1 EE （hydrochloride） （10 mg）4-[[（3-amino-2-naphthalenyl）amino]methyl]-benzoic acid， ethyl ester,， monohydrochloride,； DAN-1 EE （hydrochloride）
Prostaglandin A1 methyl ester （5 mg）15S-hydroxy-9-oxo-prosta-10，13E-dien-1-oic acid,， methyl ester,； PGA1 methyl ester； Prostaglandin A1 methyl ester
Prostaglandin E2-PEG11-biotin （50 ug）11α,，15S-dihydroxy-9-oxo-prosta-52,，13E-dien-1-oyl-polyethylene glycol 11-N’-biotinoyl-1，5-diaminopentane,； PGE2-PEG11-biotin,； Prostaglandin E2-PEG11-biotin
Stearoyl Serotonin （25 mg）N-[2-（5-hydroxy-1H-indol-3-yl）ethyl]-octadec*； Stearoyl Serotonin
3-Deaza-2’-deoxyadenosine （10 mg）1-（2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl）-1H-imidazo[4,，5-c]pyridin-4-amine,； c3dA； 3-Deaza-2’-deoxyadenosine
AS-605240 （potassium salt） （5 mg）5-（6-quinoxalinylmethylene）-2,，4-thiazolidinedione,， monopotassium salt； AS-605240 （potassium salt）
XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細胞    0.1mL×10
XL1-Blue 菌種    1mL
XL2-Blue 感受態(tài)細胞    10×100μL
XTT 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒    500 次
吸附樹脂 XAD7    100g