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人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1圖片

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更新時(shí)間:2017-01-05 09:46:44瀏覽次數(shù):313

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產(chǎn)品簡介

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1圖片售后:收到細(xì)胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決,。

詳細(xì)介紹

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1圖片
形態(tài)特性  成肌細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株, WPMY-1, 與RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609)一樣,,來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞,。 通過一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化,。 WPMY-1細(xì)胞,,與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣,屬于來源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株,。 由于它們來源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域,,WPMY-1細(xì)胞株對于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。 據(jù)提供者報(bào)道,,來源于同一個(gè)前列腺的RWPE-1細(xì)胞株(ATCC CRL-1 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,5%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 P(41+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

微型離心管研磨杵 ( 有離心管 )     50 套
維生素 B1    10g
維生素 B12    1g
維生素 B6    5g
維生素 C 測試盒    48 T
維生素 D3    1g
維生素 E    5g
胃蛋白酶    250mg
胃蛋白酶 1:10000    10g
胃蛋白酶 1:3000    5g
胃蛋白酶測試盒    24 T
胃蛋白酶抑制劑    5mg
胃蛋白酶抑制劑溶液,1 mg/mL    1mL
胃粘膜素    100mg
蝸牛酶干粉    5g
無 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL    300U
無包被磁珠    2mL
無機(jī)焦磷酸酶 ( 酵母 )    10U
無機(jī)焦磷酸酶,,熱穩(wěn)定    250U
無脊椎動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix    100 次
19(R)-hydroxy Prostaglandin F2α (50 ug)9α,,11α,15S,,19R-tetrahydroxy-prosta-5Z,,13E-dien-1-oic acid; 19
Cell-Based Assay Buffer (10X) (50 ml)Cell-Based Assay Buffer (10X)
Laemmli Buffer Stock Solution (2X) (25 mL)Laemmli Buffer Stock Solution (2X)
Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16 (10 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(8Z,,11Z,,14Z-eicosatrienoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-O-hexadecyl-2-dihomo-γ-Linolenoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine,; Dihomo-γ-Linolenoyl PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol (10 mg)5Z,,8Z,11Z,,14Z-eicosatetraenoic acid,, 2-glyceryl ester; 2-AG,; 2-Arachidonoyl Glycerol
1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol (100 mg)1-O-9Z-octadecenoyl-2-O-acetyl-sn-glycerol,; OAG; 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol
Xestospongin C (1 mg)[1R-(1R,,4aR,,11R,12aS,,13S,,16aS,23R,,24aS)]-eicosahydro-5H,,17H-1,23:11,,13-diethano-2H,,14H-[1,11]dioxacycloeicosino[2,,3-b:12,,13-b1]dipyridine,; XeC|Araguspongine E; Xestospongin C
G6PDH Enzyme Mixture (1 ea)G6PDH Enzyme Mixture
SPHK Assay Cofactor Mixture (1 ea)SPHK Cofactor Mixture,; SPHK Assay Cofactor Mixture
β-HB Developing Enzyme (1 ea)β-HB Developing Enzyme
Sesamin (1 mg)[1S-(1α,,3aα,4α,,6aα)]-5,,5’-(tetrahydro-1H,3H-furo[3,,4-c]furan-1,,4-diyl)bis-1,3-benzodioxole,; Sesamin
無內(nèi)毒素槍頭,,1 mL    1盒
無內(nèi)毒素槍頭,200 μL    1盒
無內(nèi)毒素水    50mL
無內(nèi)毒素螢火蟲熒光素    25mg

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