腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞；AAV-293圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞,；AAV-293圖片
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,，但產(chǎn)生的病毒滴度更高,。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時,，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘,。1:2,。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin:X,；CSF1PO:7,11,12,；D13S317:12；D16S539:9,13,；D18S51:17,18,；D19S433:15,18；D21S11:28,30.2,；D2S1338:19,；D3S1358:15,17；D5S818:8,9,；D7S820:11,；D8S1179:12,14；FGA:23,；TH01:7,9.3,；TPOX:11；vWA:16,19
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液,。控制吹打的力度,，避免產(chǎn)生大量的氣泡,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min,，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀,，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng),。

糖原Ⅲ型    500mg
陶瓷研缽 ( 直徑 60 mm)    1個
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)    1個
天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶    500 U
天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒    150 次
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒    20 次
天凈沙 SPIA 擴增試劑盒 ( 用于擴增 DNA 模板 )    20 次
天凈沙單細胞 RNA 擴增試劑盒    80 次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    5次
天凈沙核酸濃縮劑    30mL
天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒    150 次
天凈沙鎳柱原位再生試劑盒    20 次
天凈沙通用型MLPA 試劑盒    20 次
天凈沙細胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒     50 次
天狼猩紅    5g
天門冬酰胺酶    250UAFC[7-氨基-4-三氟甲基香豆素] 熒光參照標準AFC [7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin] Fluorescence reference standard
6-TAMRA,， SE [6-羧基四甲基羅丹明，琥珀酰亞胺酯] 可標記寡核苷酸6-TAMRA,， SE [6-Carboxytetramethylrhodamine,， succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
TQ3 馬來酰亞胺Tide Quencher 3 maleimide [TQ3 maleimide]
5/6-TAMRA標記的Asp天冬氨酸FMOC-Asp（5/6-TAMRA）-OH
二肽酰多肽酶IV （DPPIV）熒光底物Gly-Pro-AMCGly-Pro-AMC
Pluronic F-127 20%溶液于DMSO中Pluronic F-127 20% solution in DMSO
pH熒光探針BCBCF酸BCBCF acid
5（6）-FAM氨基磷酸酯5（6）-FAM Phosphoramidite
FMOC-4,，5-dehydro-L-Leu-OHFMOC-4，5-dehydro-L-Leu-OH
鬼筆環(huán)肽-iFluor 594偶聯(lián)物Phalloidin-iFluor 594 Conjugate
Cyanine 3酰肼 [相當于Cy3酰肼]Cyanine 3 hydrazide [equivalent to Cy3 hydrazide]
FITC-C6-D（OMe）E（OMe）VD（OMe）-FMKFITC-C6-D（OMe）E（OMe）VD（OMe）-FMK
Cal-520 馬來酰亞胺Cal-520 maleimide
2C-T-2 （hydrochloride） （50 mg）4-（ethylthio）-2,，5-dimethoxy-benzeneethanamine,， monohydrochloride； 2,，5-Dimethoxy-4-ethylthiophenethylamine,； 2C-T-2 （hydrochloride）
Prostaglandin D1 （10 mg）9。alpha,。,，15S-dihydroxy-11-oxo-prost-13E-en-1-oic acid； PGD1,； Prostaglandin D1
Canertinib （hydrochloride） （25 mg）N-[4-[（3-chloro-4-fluorophenyl）amino]-7-[3-（4-morpholinyl）propoxy]-6-quinazolinyl]-2-propenamide,， dihydrochloride； CI 1033|PD 183805,； Canertinib （hydrochloride）
2-methyl Benzamideoxime （1 g）（Z）-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide,； 2-methyl Benzamideoxime
2-（4-Pyridyl）-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid （100 mg）4-methyl-2-（4-pyridinyl）-5-thiazolecarboxylic acid； 2-（4-Pyridyl）-4-methyl-thiazole-5-Carboxylic Acid
天然蛋白 A    1mg
甜菜堿    10g
甜菜堿溶液,，5M,，PCR     1.5mL
甜菜堿鹽酸鹽    100g
填入法 DNA 末端標記試劑盒 A    5次