SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；PUMC-HUVEC-T1說明書采用干冰保存運(yùn)輸,。收到細(xì)胞時(shí),，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰,，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。

SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；PUMC-HUVEC-T1說明書現(xiàn)貨直銷,，免費(fèi)快遞送貨上門,。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系,，種類齊全,，現(xiàn)貨,，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱	SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,；PUMC-HUVEC-T1說明書
用途	僅用科研
保存條件	4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  PUMC-HUVEC-T1形態(tài)呈現(xiàn)為典型的鵝卵石樣排列,，已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內(nèi)皮標(biāo)記vWF,、CD31,、CD34均陽(yáng)性，可結(jié)合凝集素,，電鏡下可見緊密連接和W-P小體,，Matrigle上可形成管型。不同代數(shù)的HUVEC-T1細(xì)胞核型正常穩(wěn)定（P12,、P13,、P19、P38）,，裸鼠體內(nèi)接種不成瘤（P9和P33）,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS 40μU/L胰島素 + 40U/ml 肝素 + 1% NEAA
傳代方法  1:3～1:4傳代，一周1～2次
傳代情況 P12
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X,；CSF1PO：11,，12；D13S317：11,，13,；D16S539：9，12,；D18S51：16,，17；D21S11：28,，30,；D2S1338：17，19,；D3S1358：15,，17；D5S818：11,，13,；D6S1043：11，14,；D7S820：8,，11,；D8S1179：13，14,；FGA：24,；Penta E：15，17,；vWA：14,，16；
同工酶 
染色體  46,，XX
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸,。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化,，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研,。
儲(chǔ)存：液氮,。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度,。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三,，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后,，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為）,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,，全額退款,。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background,，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。TdT 加尾法 DNA 生物素標(biāo)記試劑盒    5次
TE 緩沖液，PH7.0    10mL
TE 緩沖液,，PH7.5    10mL
TE 緩沖液,，PH8.0    10mL
TE 緩沖液，PH8.5    10mL
TEV 蛋白酶    300U
Tfl DNA 聚合酶    100U
TG1 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
TG1 菌種    1mL
TH1 菌種    1mL
Therminator DNA 聚合酶    200U
Therminator II DNA 聚合酶    100U
Therminator γ DNA 聚合酶    200UML-336 （10 mg）（E）-2-（（1,4-dimethylpiperazin-2-ylidene）amino）-5-nitro-N-phenylbenzamide
6-EAPB （hydrochloride） （1 mg）6-（2-Ethylaminopropyl）Benzofuran,； 1-（benzofuran-6-yl）-N-ethylpropan-2-amine, monohydrochloride
cis-Tramadol （hydrochloride） CRM （2 mL）CG 315|Contramal|NIH 10969|Tramal|Ultram|Zydol,；
SureLight R-Phycoerythrin （R-PE） （1 mg）SureLight R-Phycoerythrin （R-PE）
生物素標(biāo)記*基化組蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide （100 ul）
Z-VAD-FMK， Caspase-Family抑制劑（氟甲基酮）Caspase-Family Inhibitor Z-VAD-FMK
Z-VDVAD-FMK,， Caspase-2抑制劑（氟甲基酮）Z-VDVAD-FMK
Aurora Kinase B抑制劑ADZ1152-HQPA
N-（3-Bromophenyl）-6,，7-dimethoxy-4-quinazolinamine hydrochloride: AG 1517； NSC-669364,； SU 5271PD 153035 Hydrochloride
23,，27-Epoxy-3H-pyrido[2，1-c][1,，4]oxaazacyclohentriacontine,， AY 22989， SirolimusEZSolution Rapamycin
蛋白酶抑制劑套裝IV,， EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail IV
NChloroquine Diphosphate
5-Chloro-N-[4-（cyclohexylureidosulfonyl）phenethyl]-2-methoxybenzamide,； Glyburide， N-p-[2-（5-Chloro-2-methoxybenzamido）ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
3-[（1R）-1-（2,，6-dichloro-3-fluorophenyl）ethoxy]-5-（1-piperidin-4-ylpyrazol-4-yl）pyridin-2-amineCrizotinib
Polyethylene glycol sorbitan monolaurate,， Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20， MegaPure Detergent,， 10% Solution
4-[4-（1,，3-benzodioxol-5-yl）-5-pyridin-2-yl-1H-imidazol-2-yl]benzamideSB-431542
2-（2-propylpyridin-4-yl）-4-（p-tolyl）thiazoleFatostatin
5-[4-（4-Chlorobenzoyl）-1-piperazinyl]-8-nitroquinoline， CPNQSIRT2 Inhibitor,， B2
chloro[[2,，EUK-134
LR4 激活劑    2mL
Tma 核酸內(nèi)切酶 III    500U
TMB 法地高雜交試劑盒    5次
TMB 法生物素雜交試劑盒    5次
TMRE    25mg
Tocopherol( 抗氧化劑 )    2g
*0 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10