Sars結構蛋白表達株,；293 001B圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 Sars結構蛋白表達株,；293 001B圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  表達Sars結構蛋白 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；500ug/ml IL-2
傳代方法  1:6傳代；2~3天1次
傳代情況 P10
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X,；CSF1PO：11,，12；D13S317：12,，14,；D16S539：9；D18S51：18,，22,；D19S433：18；D21S11：28,，30.2,；D2S1338：19；D3S1358：15,，17,；D5S818：8，9,；D7S820：11,，12；D8S1179：12,，14,；FGA：23，24,；TH01：7,，9.3；TPOX：11,；vWA：16,，19；
同工酶 
染色體  
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。
二,、細胞處理：
1,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘,，少量保存上清液（防止細胞吸走）,，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中,，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等，購買到貨后,，由我們實驗室擴增,、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,，100%進口來源,，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%,，無細菌,、真菌、支原體污染,。   細胞到達客戶手中,，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶,，使胰酶的量能蓋住細胞,，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察,，待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基,，晃動細胞瓶,，終止胰酶作用,，用吸管小心吹打貼壁的細胞,，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基,，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況,。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),，1000rpm離心5min，棄去上清,，加入新鮮的培養(yǎng)基,，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液,，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng),。

生物素化的牛血清白蛋白    25mg
生物素化山羊抗親和素    0.5mg
生物素化兔 IgG    5mg
濕法電轉液 ( 干粉 )    20L
濕潤劑 P-40    100mL
十二烷基磺酸鈉    100g
十二烷基磺酸鈉清除劑    25mL
十二烷基肌氨酸鈉    25g
十二烷基硫酸鈉    100g
十六烷基*基溴化銨    25g
石蠟包埋組織 DNAout    30 次
石蠟包埋組織 RNAout    30 次
石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒    50 次
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒    30 次
石蠟油,，PCR     10mLNaringenin （1 g）2S，3-dihydro-5,，7-dihydroxy-2-（4-hydroxyphenyl）-4H-1-benzopyran-4-one,； S-Dihydrogenistein|NSC 11855|NSC 34875|Salipurol； Naringenin
Magnolol （25 mg）5,，5’-di-2-propen-1-yl-[1,，1’-biphenyl]-2,，2’-diol； NSC 293099,； Magnolol
Hygromycin B （500 mg）O-6-amino-6-deoxy-L-glycero-D-galacto-heptopyranosylidene-（1→2-3）-O-β-D-talopyranosyl-（1→5）-2-deoxy-N3-methyl-D-streptamine,； Hygromycin B
JWH 081 N-pentanoic acid metabolite （1 mg）5-（3-（4-methoxy-1-naphthoyl）-1H-indol-1-yl）pentanoic acid； JWH 081 N-pentanoic acid metabolite
SIRT1/2 Inhibitor IV （1 mg）2,，3-dihydro-5-[（2-hydroxy-1-naphthalenyl）methyl]-6-phenyl-2-thioxo-4（1H）-pyrimidinone,； Cambinol|NSC 112546|SIRT1 Inhibitor II|SIRT2 Inhibitor VI； SIRT1/2 Inhibitor IV
Pseurotin A （1 mg）（5S）-8S-benzoyl-2-[1S,，2S-dihydroxy-3Z-hexen-1-yl]-9R-hydroxy-8-methoxy-3-methyl-1-oxa-7-azaspiro[4,。4]non-2-ene-4，6-dione,； NSC 348694,； Pseurotin A
Adenosine 5’-triphosphate （sodium salt） （10 g）adenosine 5’-（tetrahydrogen triphosphate）， disodium salt,； ATP|NSC 20268,； Adenosine 5’-triphosphate （sodium salt）
L-AP4 （1 mg）2S-amino-4-phosphono-butanoic acid； L-（+）-2-amino-4-phosphorobutanoic acid|L-APB,； L-AP4
Ro 25-6981 Maleate （1 mg）αR-（4-hydroxyphenyl）-βS-methyl-4-（phenylmethyl）-2Z-butenedioate-1-piperidinepropanol,； Ro 25-6981 Maleate
Citicoline （sodium salt） （1 g）P’-[2-（trimethylammonio）ethyl] ester-cytidine 5’-（trihydrogen diphosphate）-inner， monosodium salt,； Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron,； Citicoline （sodium salt）
D-Luciferin （sodium salt） （100 mg）4，5-dihydro-2-（6-hydroxy-2-benzothiazolyl）-4S-thiazolecarboxylic acid,， monosodium salt,； D-Luciferin （sodium salt）
CAY10677 （1 mg）5-（2-amino-5-pyrimidinyl）-N，N-diethyl-1-octyl-1H-indole-3-methanamine,； Icmt Inhibitor 15,； CAY10677
石榴紅硫酸鹽    1g
嗜熱菌蛋白酶    25mg
雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷    5g
雙酶一管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)    50 次
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 488·PI）     20 次