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干細(xì)胞培養(yǎng)瓶的選擇
閱讀:105 發(fā)布時(shí)間:2017-8-30干細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型),;培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12,、24,、48,、96、384,、1536 孔等,;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型,、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>
(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途,。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,,這樣便于鏡下觀測,、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對一致,。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),,無論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板,。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板,。要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示"Tissue Culture (TC) Treated"是養(yǎng)細(xì)胞用的,。
U型或V型板,,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),,需要二者相互接觸刺激,這時(shí)一般會選用U型板,,因?yàn)榧?xì)胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi),。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),,需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),,如"混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)"等。V型板常用做細(xì)胞殺傷,、免疫學(xué)血凝集實(shí)驗(yàn),。細(xì)胞殺傷這種實(shí)驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心),。
(2)Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,,產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同,。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu),。
細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料,,材料是treated sufface,,便于細(xì)胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長材料,,同時(shí)還有l(wèi)ow binding surface
(3)細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),也可以用來測蛋白濃度,;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,,一般不用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,,需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液,。
(4)常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
干細(xì)胞不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表),。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染,。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握,。
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