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腫瘤細胞生物學(xué)特性
閱讀：338 發(fā)布時間：2017-7-12腫瘤細胞與體內(nèi)正常細胞相比,，不論在體內(nèi)或在體外，在形態(tài),、生長增值,、遺傳性狀等方面都有顯著的不同。生長在體內(nèi)的腫瘤細胞和在體外培養(yǎng)的腫瘤細胞,，其差異較小,，但也并非*相同。培養(yǎng)中的腫瘤細胞具以下突出特點：
（一）形態(tài)和性狀
培養(yǎng)中癌細胞無光學(xué)顯微鏡下特異形態(tài),，大多數(shù)腫瘤細胞鏡下觀察比二倍體細胞清晰,，核膜、核仁輪廓明顯,，核糖體顆粒豐富,。電鏡觀察癌細胞表面的微絨毛多而細密，微絲走行不如正常細胞規(guī)則,，可能與腫瘤細胞具有不定向運動和錨著不依賴性有關(guān),。
（二）生長增殖
腫瘤細胞在體內(nèi)具有不受控增殖性，在體外培養(yǎng)中仍如此,。正常二倍體細胞在體外培養(yǎng)中不加血清不能增殖,，是因血清中含有很細胞增殖生長的因子，而癌細 胞在低血清中（2％～5％）仍能生長,。已證明腫瘤細胞有自泌或內(nèi)泌性產(chǎn)生促增殖因子能力,。正常細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化后，出現(xiàn)能在低血清培養(yǎng)基中生長的現(xiàn)象,，已成為 檢測細胞惡變的一個指標,。癌細胞或培養(yǎng)中發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化后的單個細胞培養(yǎng)時，形成集落（克?。┑哪芰Ρ日＜毎麖?。另外癌細胞增殖數(shù)量增多擴展時，接觸抑制 消除,，細胞能相互重疊向三維空間發(fā)展,，形成堆積物。
（三）永生性
永生性也稱不死性,。在體外培養(yǎng)中表現(xiàn)為細胞可無限傳代而不凋亡（Apoptosis）,。體外培養(yǎng)中的腫瘤細胞系或細胞株都表現(xiàn)有這種性狀,，體內(nèi)腫瘤 細胞是否如此尚無直接證明。因惡性腫瘤終將殺死宿主并同歸于盡,，從而難以證明這一性狀的存在,。體外腫癌細胞的永生性是否能反證它在體內(nèi)時同樣如此？也尚難 肯定,。從近年建立細胞系或株的過程說明,，如果永生性是體內(nèi)腫瘤細胞所固有的，腫瘤細胞應(yīng)易于培養(yǎng),。事實上,，多數(shù)腫瘤細胞初代培養(yǎng)時并不那么容易。生長增殖 并不旺盛,；經(jīng)過純化成單一化瘤細胞后,，也大多增殖若干代后，便出現(xiàn)類似二倍體細胞培養(yǎng)中的停滯期,。過此階段后才獲得永生性,，順利傳代生長下去。從而說明體 外腫瘤細胞的永生性有可能是體外培養(yǎng)后獲得的,。從一些具有永生性而無惡性性的細胞系,，如NIH3T3,、Rat－1,、10T1/2等細胞證明，永生性和惡性 （包括浸潤性）是兩種性狀,，受不同基因調(diào)控,，但卻有相關(guān)性?？赡苡郎允羌毎麗鹤兊碾A段,。至少在體外是如此。
（四）浸潤性
浸潤性是腫瘤細胞擴張性增殖行為,，培養(yǎng)癌細胞仍持有這種性狀,。在與正常組織混合培養(yǎng)時，能浸潤入其它組織細胞中,，并有穿透人工隔膜生長的能力,。
（五）異質(zhì)性
所有腫瘤都是由有增殖能力、遺傳性,、起源,、周期狀態(tài)等性狀不同的細胞組成。異質(zhì)性構(gòu)成同一腫瘤內(nèi)細胞的活力有差別的瘤組織,；處于瘤體周邊區(qū)的細胞獲 得血液供應(yīng)多,，增殖旺盛,，中心區(qū)有的細胞衰老退化，有的處于周期阻滯狀態(tài),，那些呈活躍增殖狀態(tài)的細胞稱干細胞（Stem Cells）,、只有這些干細胞才是支持腫瘤生長的成分。腫瘤細胞培養(yǎng)時易于生長增殖,；把干細胞分離出來的培養(yǎng)方法稱干細胞培養(yǎng),。
（六）細胞遺傳
大多數(shù)腫瘤細胞有遺傳學(xué)改變，如失去二倍體核型,、呈異倍體或多倍體等,。腫瘤細胞群常由多個細胞群組成，有干細胞系和數(shù)個亞系,，并不斷進行著適應(yīng)性演變,。
（七）其它
腫瘤細胞在體外不易生長的原因可能由于：
①依賴性：腫瘤細胞雖有較強克隆生長力，但仍有一定的群體性或與其它細胞相依存關(guān)系,。一是腫瘤細胞與腫瘤細胞的相互依存,，二是腫瘤細胞與基質(zhì)成纖維細胞的依賴。體外分散培養(yǎng)和排除成纖維細胞后也會同時消除或減弱這些依存關(guān)系,，可能影響癌細胞增殖生長的活性,；
②腫瘤細胞的自泌也會因分散培養(yǎng)而被稀釋，達不到腫瘤生長的需求,，降低腫瘤細胞的生長增殖力,；
③并非所有腫瘤細胞都有強的生長活力和長的Life Span，只有干細胞才有強的增殖生長能力,，但這些細胞數(shù)量很少,；
④離體培養(yǎng)腫瘤細胞可能需求與體內(nèi)相似的特殊生存條件。
有細胞增殖,，傳若干代后停止生長或衰退死亡,；
傳數(shù)代后細胞增殖緩慢，經(jīng)過一段停滯期后,，才又呈旺盛生長狀態(tài),，形成穩(wěn)定生長的腫瘤傳代細胞系。
以上現(xiàn)象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求,，并需經(jīng)過對新環(huán)境的適應(yīng)才能生長,，因此欲獲得好的培養(yǎng)效果，不能局限于一般培養(yǎng)法,，必須采用一些特殊的措施,。
1、適宜底物：把經(jīng)過純化的細胞接種在不同的底物上,，如鼠尾膠原底層,、飼細胞層等,。
2、生長因子：應(yīng)用促細胞生長因子,，向培養(yǎng)液中增加一種或幾種促細胞生長因子,。根據(jù)細胞種類不同選用不同的促生長物，常用有胰島素,、雌激素以及其它生長因子,。
為提高腫瘤細胞對體外培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)力和增加有活力癌細胞（干細胞）的數(shù)量，可采用動物體轉(zhuǎn)嫁接種成瘤后,，再從動物體內(nèi)取出進行培養(yǎng),，能提高體外培養(yǎng)的成功率。受體動物以裸鼠,。
3,、動物體媒介培養(yǎng)方法：
（1）瘤塊接種：取新鮮瘤組織，用Hanks液洗凈血污,，切成1～3毫米小塊,，用穿刺針頭吸一小瘤塊，用酒精棉球擦拭動物腹部后,，直接刺入皮下,，注入瘤塊；
（2）飼養(yǎng)觀察,，待腫瘤生長達較大體積后,，剝?nèi)〕隽鼋M織；
（3）進行體外培養(yǎng),。
（4）為防止失敗,，仍取部分瘤組織繼續(xù)在裸鼠體內(nèi)傳代,。通過裸鼠媒介接種,，有活力的腫瘤細胞數(shù)量增多，細胞培養(yǎng)易于成功,。
腫瘤細胞培養(yǎng)方法與培養(yǎng)正常細胞*相同,，但成功率比正常細胞高。