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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>公司動態(tài)>>ATCC細(xì)胞原蟲污染原因
培養(yǎng)液可輕微渾濁,,在顯微鏡下細(xì)小的點狀物數(shù)量非常多,,輕微活動,,ATCC細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮,。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,,細(xì)胞占優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長,,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長,zui終形成惡性循環(huán),。
ATCC細(xì)胞污染的可能原因:配液消毒問題,、操作問題、環(huán)境問題等等,。
關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),,37 度試培養(yǎng)一段時間后觀察,。如果沒有細(xì)菌生長 就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素),。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài),,所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗,,以避免影響實驗結(jié)果,。
ATCC細(xì)胞實驗前,超凈臺/實驗間紫外照射30min,,細(xì)胞培養(yǎng)室有24h的空氣消毒裝置更好了,。操作前70%酒精擦超凈臺消毒,酒精擦手,,擦培養(yǎng)瓶,,擦培養(yǎng)基瓶以及各種瓶子的口,總之,所有進(jìn)超凈臺的物品都用酒精擦拭一遍,。拿培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時候盡量托下面拿,,切忌不要拿瓶頸部位。有一點要注意的是,,超凈臺里面的東西一定要盡量少放,,東西太多活影響超凈臺內(nèi)空氣流通及空氣除菌。實驗過程中盡量避免打鬧說笑,。
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