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*,、腫瘤耐藥細(xì)胞株的生長情況
胚胎干細(xì)胞性很高,,可以分化成各種細(xì)胞,,細(xì)胞株能夠傳到40-50代,,但遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,。而細(xì)胞系是細(xì)胞傳至50代以后生存下來,,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),。有可能在培養(yǎng)條件下無限增殖,。安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄,。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況,。
1.如果細(xì)胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。
2.如果細(xì)胞已長滿,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
第二,、腫瘤耐藥細(xì)胞株的具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若干細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。
第三、腫瘤耐藥細(xì)胞株的注意事項(xiàng):
1.觀察細(xì)胞在低倍鏡下進(jìn)行,,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下,。
2.瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3.有些干細(xì)胞貼壁不牢,,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
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