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ATCC細胞因子的溶解方法介紹

時間:2017-3-27閱讀:369
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ATCC細胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑,,并且通常以zui少量的鹽來進行凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,,形成很薄或不可見的蛋白層,。所以我們建議在收到產品后,,務必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正?,F象),。 
1.離心:高速離心20-30秒,或低速離心5分鐘,。 
2.溶解:細胞因子用去離子水或其它緩沖液溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL,,如10ug的產品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解),。溶解時不可振蕩,,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間,,待ATCC細胞因子*溶解后使用,。溶劑的選擇: 
(1)要求用去離子水溶解的產品,務必不可用鹽溶液,,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出,; 
(2)要求用鹽溶液溶解的產品,請依照細胞因子說明書上的濃度,,同樣也是為了避免過高的鹽濃度,。 
3.分裝和貯存:ATCC細胞因子蛋白溶解后可根據自己的實驗需要進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI 1640,、DMEM或PBS等溶液,,其中含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)來穩(wěn)定蛋白,。工作液在4℃可保存1周,,如需長期保存,,則需分裝凍存于-20℃ (注意:不可凍存于-80℃),。分裝時每管中工作液的體積是一次實驗的用量,以實現每次實驗用完一只工作液,,避免反復凍融引起蛋白活性的降低,。

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