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根據干細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代,、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）,、貼壁生長細胞傳代。

培養(yǎng)細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法,。貼壁生長的細胞用消化法傳代,；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,，或用自然沉降法吸除上清后,，再吹打傳代。

實驗步驟：

1.  貼壁細胞的消化法傳代：

（1）吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,。

（2）D-Hanks液洗2～3次,。

（3）向瓶內加入適量消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使消化液流遍所有細胞表面,。

（4）然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液,，輕輕搖動再倒掉大部分消化液，僅留少許進行消化（也可不采用上述步驟直接加消化液進行消化）,。

注意事項：

1.  胰蛋白酶要預溫,，溫度37℃左右為宜℃。

2.  離心轉速要合適,，轉速過低,，不能有效分離細胞，離心速度過大,，時間過長,，會擠壓細胞造成損傷甚至死亡。

3.  要定時觀察干細胞,，發(fā)現污染,，應及時處理。

2183-17-7 1-萘磷酸鈉鹽 英文名稱： CAS號： ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DISODIUM SALT

81012-89-7 1-萘磷酸鈉鹽(+4°C) 英文名稱： CAS號： 1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE

67000-89-9 1-芘丁醇 99％ 英文名稱： CAS號： 1-PYRENEBUTANOL

3443-45-6 1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 英文名稱： CAS號： 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid

19694-02-1 1-芘甲酸 97％ 英文名稱： CAS號： 1-PYRENECARBOXYLIC ACID

711-79-5 1-羥基-2-乙酰萘 英文名稱： CAS號： 1'-HYDROXY-2'-ACETONAPHTHONE

39968-33-7 1-羥基-7-氮雜苯并三氮唑 (HOAt)（2-8℃） 英文名稱： CAS號： 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole

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