根據(jù)干細(xì)胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細(xì)胞傳代,、半懸浮生長細(xì)胞傳代（Hela細(xì)胞）、貼壁生長細(xì)胞傳代,。

培養(yǎng)細(xì)胞傳代根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法,。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細(xì)胞用直接吹打可傳代,；懸浮生長的細(xì)胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代,。

實驗步驟：

1.  貼壁細(xì)胞的消化法傳代：

（1）吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,。

（2）D-Hanks液洗2～3次。

（3）向瓶內(nèi)加入適量消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養(yǎng)瓶,，使消化液流遍所有細(xì)胞表面,。

（4）然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液，輕輕搖動再倒掉大部分消化液,，僅留少許進(jìn)行消化（也可不采用上述步驟直接加消化液進(jìn)行消化）。

注意事項：

1.  胰蛋白酶要預(yù)溫,，溫度37℃左右為宜℃,。

2.  離心轉(zhuǎn)速要合適，轉(zhuǎn)速過低,，不能有效分離細(xì)胞,，離心速度過大，時間過長,，會擠壓細(xì)胞造成損傷甚至死亡,。

3.  要定時觀察干細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)污染,，應(yīng)及時處理,。

2183-17-7 1-萘磷酸鈉鹽 英文名稱： CAS號： ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DISODIUM SALT

81012-89-7 1-萘磷酸鈉鹽(+4°C) 英文名稱： CAS號： 1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE

67000-89-9 1-芘丁醇 99％ 英文名稱： CAS號： 1-PYRENEBUTANOL

3443-45-6 1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 英文名稱： CAS號： 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid

19694-02-1 1-芘甲酸 97％ 英文名稱： CAS號： 1-PYRENECARBOXYLIC ACID

711-79-5 1-羥基-2-乙酰萘 英文名稱： CAS號： 1'-HYDROXY-2'-ACETONAPHTHONE

39968-33-7 1-羥基-7-氮雜苯并三氮唑 (HOAt)（2-8℃） 英文名稱： CAS號： 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole

干細(xì)胞