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做轉(zhuǎn)化細(xì)胞實驗,，細(xì)胞鋪板大概是zui常見的一個實驗了,。但是有很多人不是很得要領(lǐng),，鋪得不是均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂,。以下是我的一些技巧,，希望可以幫助到大家。
1.一般96孔板我每孔是加100微升細(xì)胞懸液,，從孔的左邊靠近底部加入,，加完半邊板后,，將未加的細(xì)胞懸液混一下再，繼續(xù)加剩余的半邊板子,，都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊,，右手輕輕敲擊板的右邊緣,，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好）,，依次敲擊剩余三個邊,，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。
6孔板12孔板或24孔板,，我均采用將*個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔,，同樣方法浸潤孔底,，其它孔一次類推，這樣整個孔底都是濕潤的,，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，加細(xì)胞懸液的時候可以避免加在中間中間細(xì)胞多,，而加在周邊晃勻后周邊細(xì)胞多中間少的現(xiàn)象,，細(xì)胞分散較均勻，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下,。這個方法就是有點(diǎn)慢,，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,，但力度沒有96孔板好掌握,，效果沒有96孔板好，所以我放棄改用浸潤孔底的方法,。
2. 細(xì)胞實驗中細(xì)胞懸液加完后，將細(xì)胞培養(yǎng)板抬高,，對著燈光，從底部往上看,，看細(xì)胞有沒有抱團(tuán)。然后從底部敲擊,，使之分散,。
3.如果實驗室有平板振蕩器的話，我建議用這個儀器稍振蕩一下,，效果不錯,，就是振幅小，頻率高的那種,。
4.轉(zhuǎn)化細(xì)胞實驗中細(xì)胞要盡量打散,，大部分呈單個狀態(tài),。離心后，要充分懸??！還有轉(zhuǎn)移到六孔板后，是要晃得,！晃的時候不要讓那個細(xì)胞液轉(zhuǎn)圈,，不然細(xì)胞就全被帶到中間去了，就會不均勻,！
100215-200601    檢查用    100mg    乙羥茶堿
100216-200702    含量測定    100mg    鹽酸安他唑啉
100218-199601    含量測定    50mg    鹽酸美西律
100219-199902    含量測定    50mg    鹽酸酚芐明
100222-200702    鑒別    50mg    鹽酸羅通定
100223-200102    含量測定    50mg    鹽酸維拉帕米
100224-200903    含量測定    100mg    異維A酸
100225-200502    含量測定    100mg    貝諾酯
100226-200404    含量測定    50mg    半乳糖
100227-201001    供UV法含量測定    30mg    醋酸去氧皮質(zhì)酮
100228-199802    含量測定    50mg    醋酸甲萘氫醌
100229－200803    HPLC法含量測定    100mg    富馬酸氯馬斯汀
轉(zhuǎn)化細(xì)胞