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檢測DNA合成是目前檢測轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖zui準(zhǔn)確可靠的方法,,目前常用的方法有如下幾種:
(1)3H-胸腺嘧啶核苷滲入法(3H-TdR):胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA合成的前體物,,處于S期的細(xì)胞不斷地攝取TdR用以合成DNA。3H-TdR摻入法是將被放射性標(biāo)記的3H-TdR摻入DNA合成期的細(xì)胞,,細(xì)胞內(nèi)3H-TdR摻入量的多少可客觀反映細(xì)胞復(fù)制DNA能力的大小,,從而問接了解細(xì)胞增殖情況,。通過檢測。H放射活性即可反映DNA含量。
1976年Mattem等首先采用此方法做體外藥敏試驗(yàn),。此后經(jīng)過長期的廣泛研究,,也己證實(shí)該法對各種動物腫瘤及人類腫瘤均有較好的預(yù)測價值和重復(fù)性,,主要用于細(xì)胞增殖的檢測與藥物敏感性試驗(yàn)等,。但這種方法操作復(fù)雜,,試劑含有同位素,,具有放射性,對實(shí)驗(yàn)者有一定的危害,故限制了它的應(yīng)用,。
(2)BrdU檢測法:BrdU中文全名為5-溴脫氧尿嘧啶核苷,,為胸腺嘧啶的衍生物,可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)摻入,,而后利用抗BrdU的抗體耦聯(lián)不同的酶,,加入不同發(fā)光特性的底物,然后再通過比色法,、化學(xué)發(fā)光檢測或熒光信號檢測底物強(qiáng)度等步驟,,反映BrdU的摻入量。該方法不需要再和放射性物質(zhì)打交道,。
(3)EdU檢測法:BrdU雖然解決了接觸同位素的問題,,但該方法需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,但這就破壞了DNA雙鏈結(jié)構(gòu),,對某些后續(xù)或同時進(jìn)行的試驗(yàn),,如其他染料的結(jié)合染色有影響。現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測,。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,,但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見,在轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖時能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,,基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行快速的細(xì)胞增殖檢測分析,,可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,,更簡單,,更快速,更準(zhǔn)確,。
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 組氨酸 20mg/支 英文名稱 110890-200001 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 黃山藥皂苷提取物 20mg/支 英文名稱 110891-200001 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 積雪草苷 20mg/支 英文名稱 110892-200604 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 羥基積雪草苷 20mg/支 英文名稱 110893-200201 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 甜菜堿 20mg/支 英文名稱 110894-200503 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 雪上一枝蒿甲素 20mg/支 英文名稱 110895-200303 規(guī)格:
鑒別 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) 琥珀酸 20mg/支 英文名稱 110896-200001 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) α-蒎烯 20mg/支 英文名稱 110897-200001 規(guī)格:
含量測定 含量: 進(jìn)口/國產(chǎn) γ-亞麻酸甲酯 20mg/支 英文名稱 110898-200503 規(guī)格:
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