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腫瘤細(xì)胞四步消化法具體操作

1）.首先不加胰酶,，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。

2）.然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來,。再用培養(yǎng)基洗一遍,，兩次所得懸液混合傳入新瓶,。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）

3）.吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,，吸掉棄之,，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈彈頭里備用,，加入新培養(yǎng)基開始吹打,，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存,。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（也可以傳入新瓶培養(yǎng),，以與后面及前面的做對(duì)比,。）

4）.然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,，如果你們那比較富裕的話,，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,，待剩余細(xì)胞間隙明顯,，腫瘤細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶,，加入新培養(yǎng)基吹打,。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（據(jù)實(shí)際情況把握）。
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腫瘤細(xì)胞