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高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒使用方法
閱讀：85 發(fā)布時間：2022-7-29| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 14.7KB |
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高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒說明書
檢測范圍：12.5pg/mL~400pg/mL
保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個月,，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標板,，試劑,，標準品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本主要成分：酶標板,試劑,標準品等,。
試劑盒種屬：馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..
試劑盒組成：
120 倍濃縮洗滌液30ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶
2酶標試劑6ml×1 瓶8標準品（270ng/L）0.5ml×1 瓶
3酶標包被板12 孔×8 條9標準品稀釋液1.5ml×1 瓶
4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書1 份
5顯色劑 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張
6顯色劑 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 個
樣本要求：
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
2400 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
1200ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
600ng/L 3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
300ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
150ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,，酶是一種有機催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
實驗注意事項：
1,、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體,；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要,，重復(fù)此過程數(shù)次,。
2、自動洗板：如果有自動洗板機,，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,，因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6,、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期：6個月。