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植物維生素C(VC)ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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植物維生素C(VC)ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

【中文名稱】:植物維生素C(VC)ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒
【英文名稱】:Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【保存條件】:2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】:6個(gè)月,,所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等。ELISA試劑盒檢測(cè)范圍:人,、綿羊,、小鼠、大鼠,、豬,、兔、山羊,、牛,、馬、豬,、其它動(dòng)物細(xì)胞因子,、植物細(xì)胞因子、骨代謝,、細(xì)胞凋亡,、激素內(nèi)分泌、活性多肽,、肝纖維化,、自身抗體、血栓與止血,、腫瘤,、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒。 主要用于科研方面,,不用于臨床診斷,。可以用于檢測(cè)各種指標(biāo),。
植物維生素C(VC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中維生素C(VC)水平,。用純化的維生素C(VC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入維生素C(VC),,再與HRP標(biāo)記的維生素C(VC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素C(VC)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中維生素C(VC)濃度。 
植物維生素C(VC)ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒索取說(shuō)明書(shū)或有技術(shù)問(wèn)題請(qǐng)的在線銷售人員,!凡在公司購(gòu)買ELISA試劑盒的客戶,,可享受我司提供的免費(fèi)代測(cè)服務(wù)、全程技術(shù)指導(dǎo)及完整的售前售中售后服務(wù),,如有問(wèn)題請(qǐng),,我們會(huì)以快的速度為您解答!
樣本處理及要求

1.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用。

2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

3. 不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。

植物維生素C(VC)elisa試劑盒操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。

3.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,,空白孔除外。

4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。

5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。

6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。

7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

8.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。

9.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
植物維生素C(VC)elisa試劑盒注意事項(xiàng)

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。

5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

6. 底物請(qǐng)避光保存。

7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。

10. 試劑盒2-8℃冷藏,,保質(zhì)期6個(gè)月。

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