植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）elisa試劑盒說明書

本試劑盒僅供研究使用

實驗原理
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度,。

樣本處理要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。 

2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心,。

3.尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。

4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
植物吲哚乙酸氧化酶(IAAO）ELISA試劑盒組成注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值,。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用,。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品,。

10. 實驗還需要酶標(biāo)儀（450nm）,，37℃恒溫箱，高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水,。

11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用,。

12. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

13. 如果可能傳播疾病,，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

14.標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能人上進行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

15.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 品種齊全,、質(zhì)量可靠、靈敏度高,、特異性強,、重復(fù)性好、操作簡便,、穩(wěn)定性好,。

2. 同城（上海）需要代測可免費上門取樣，享免費送貨上門服務(wù),。

3. 訂購ELISA試劑盒可提供免費代測服務(wù),。

4. 現(xiàn)貨直發(fā)，順豐速運,，全國包郵 ,。