兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒檢測(cè)說(shuō)明：
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個(gè)月
樣本：血清、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
特點(diǎn)：敏感性高,、特異性強(qiáng),、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測(cè)定血清,，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性,。
種屬：人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚(yú)等。
運(yùn)輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng),，一般為快遞運(yùn)輸,，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨,。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法,。
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒標(biāo)本要求：
包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1.血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
2.血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
3.尿液：
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)行,。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用,。
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒操作步驟：
1,、使用前，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2,、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時(shí)。
4,、甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。
5,、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。
6,、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
7,、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8,、取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9,、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒特點(diǎn)：
1,、專一性強(qiáng),。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原（或抗體），使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別,。
2、靈敏度高,。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng),，顯示抗原與抗體的結(jié)合,，大大提高了檢測(cè)的靈敏性，使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法,。
3,、樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,，因此有利于樣品的保存,。
4、結(jié)果易觀察,。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,，還可用顯微鏡觀察,。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測(cè)物的顯示,。
5、可以定量測(cè)定,。溶液中的抗原物質(zhì),，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,，依據(jù)光密度值的變化，可以定量,。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定,。
6、可以大規(guī)模測(cè)定樣品,。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7,、.儀器和試劑簡(jiǎn)單,。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡,，也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實(shí)驗(yàn)室及應(yīng)用單位均易購(gòu)置,。